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兽医微生物ppt课件
新城疫病毒
Newcastle disease virus ( NDV ) ;NDV是禽副粘病毒I型,为不分节段单分子负链RNA病毒。
属于副粘病毒科,副粘病毒亚科。原被归为副粘病毒属,1993年被划为腮腺炎病毒(Rubuluvirus)属。现称为Avulavirus病毒属
副粘病毒科中NDV是唯一的一个其宿主不是哺乳动物而是鸟类的一个成员。; ;环境物质; NDV病毒粒子大致呈球形,有囊膜,直径为100-500nm。病毒粒子表面有长约8nm的纤突。
NDV可凝集所有两栖动物、爬行动物和禽类的红细胞。
血凝特性和抗血清的特异性血凝抑制是ND的有效诊断手段。;致病性:高致病性(速发型)、中致病性(中发型)无致病性(缓发型)三种。
临床:嗜内脏速发型、嗜神经速发型、中发型、缓发型和无症状嗜肠型五种。;OIE根据NDV致病性实验所提出的5个判定标准:
最小致死量病毒致死鸡胚得平均时间(MDT)
1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)
6周龄鸡静脉致病指数(IVPI)
病毒凝集红细胞后的解脱速率
病毒对热(56℃,30分钟)的稳定性
NDV的结构多肽、寡核苷酸指纹图谱及与植物血凝素结合能力不同等指标也有助于NDV的分类。;实验方法 强毒力株 中等毒力株 低毒或弱毒株
MDT 40~60 60~90 90,一般4~5天
ICPI 1.6~2.5 0.6~1.5 0.0~0.5
IVPI 1 0.0~0.8 0.0
V 慢 快 快
S 15~20 5 5
注:MDT,最小致死量病毒致死鸡胚的平均时间;ICPI,1日龄雏鸡脑内注射致病指数;IVPI ,6周龄鸡静脉内注射致病指数;V,病毒凝集红细胞后解脱速率;S,病毒血凝集对热的稳定性(56℃,min);I am NDV !;新城疫病毒的基因结构
目前NDV的基因组全长有15186bp和15192 bp两种 (6x)
依次排列着NP、P、M、F、HN和L基因,
即3′-NP-P-M-F-HN-L-5’
分别编码6种结构蛋白:核衣壳蛋白(NP)、磷蛋白(P)、基质蛋白(M)、融合蛋白(F)、血凝素-神经氨酸酶(HN)和大分子蛋白(L)。;Genome of NDV and functions ; NDV基因组3′端含有55nt或56nt
5′端分别114nt的引导序列(Leader sequence)与尾随序列???Trailer sequence)。
;NDV 6个结构基因之间由不同长度(1-47nt)的基因间隔区分开,基因间隔区的作用可能是参与上一个基因mRNA转录的终止及下一个基因的转录起始。;;NP蛋白;P蛋白;RNA的编辑;M蛋白;F蛋白;Ballagi等于1996年提出了基因型的概念。将F基因约75%的基因片段(即第334-1682位核苷酸)扩增后,用三种限制性内切酶(HinfI、BstOI 、RsaI)进行酶切电泳,根据酶切电泳的图谱特征,将NDV各毒株分为不同的型。;根据基因分型的方法,现已将世界各地NDV分为九个型(Ⅰ-Ⅸ)。且每一型中又可分为不同的亚型,如基因Ⅵ型可分为Ⅵa、Ⅵb、Ⅵc等。研究发现,我国大陆现今的NDV流行株在基因型上主要是基因Ⅶd。; NDV强毒株
112R/K-R-Q-K/R-R-F117
112G/E-K/R-Q-G/E-R-L117
NDV弱毒株
而且强毒株的F1多肽的氨基端一般为苯丙氨酸残基,相反弱毒株的该残基则被亮氨酸所取代 。;NDVF蛋白裂解位点的Aa分布情况;成熟的HN蛋白是由亚单位之间通过二硫键最终结合成四聚体寡聚蛋白。
HN蛋白具有血凝素和神经氨酸酶两种活性,前者负责识别靶细胞中含唾液酸的受体,介导病毒对靶细胞的吸附;后者则具有破坏分解受体的能力。
;HN蛋白;HN蛋白的大多数功能位点和神经氨酸酶活性点等主要位于球状区。
Hulslander等于1999年分析发现,在HN蛋白柄部含有2 个HR,在74~110位残基内,HR内的氨基酸突变后,病毒的融合活性明显下降。;尽管各毒株HN基因全长均为2.0kb
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