C22-退伍軍人菌於水中之之失活效率評估與比較-簡光廷.docVIP

退伍軍人菌之效評估1,許昺慕2,林玉庭3,陳彥潔3,陳榮盛4,馬帛樺1　 1國立中正大學 應用地球物理所 研究生　 2國立中正大學 地球與環境科學系 助理教授　 3國立中正大學地球與環境科學系 大學部學生　　 4國立中正大學 地震研究所 研究生　 　 退伍軍人桿菌(Legionella)普遍存在於各種水體環境中，如河川、溫泉、空調冷卻系統、供水系統及浴室蓮蓬頭等。退伍軍人桿菌可能會經由水塔或水幕產生的微小水滴散佈於空氣中，造成人類感染退伍軍人症。根據調查，國內冷卻水塔及溫泉中檢測出退伍軍人桿菌之比例分別超過四成及兩成，而感染退伍軍人症之病例也逐年增加。因此，尋找有效之消毒方式使其失活是相當重要的。本研究分別使用紫外光、蛋白質分解酵素(Protease)、次氯酸鈉等三種殺菌方式，在不同濃度及時間之操作條件下，探討退伍軍人桿菌之失活率。結果顯示，紫外光照射兩分鐘後，即可達到97.9％失活率，五分鐘後則可達到100％失活率。在添加次氯酸鈉部分，有效率濃度在0.6ppm需反應達12小時方能達到99%，若將濃度提升至3ppm，則需0.5小時即可達到99%。在蛋白質分解酵素部分，100ppm及500ppm均無法在24小時內達到99%，1000ppm則在3小時候可達到99%。　　　　　　egionella)、失活效率　　　　　　　　　冷卻水塔、除濕機、蓮蓬頭、噴水池根據行政院衛生署檢疫總所對給水系統調查，結果顯示出退伍軍人桿菌在不同給水系統中大約30%屬於未受退伍軍人桿菌污染或輕微污染的（10/ mL），約60%屬於低或中程度的污染（10～100/ mL），10%是受到較高度污染的（100～1,000 /mL）疾病管制局針對台灣地區各縣市冷卻水塔、飲水機、蓮蓬頭、水龍頭、池水等整體環境退伍軍人桿菌檢出率作調查，結果台南市陽性率為65.85%，桃園縣陽性率為55.65%，台北縣陽性率為52.27%，台中市陽性率為42.31%，其餘依序為台北市、南投縣、彰化市、雲林縣、新竹市、屏東市、嘉義市、高雄市、苗栗市，最低為基隆市10.26%。2000、2001、2002、2003、2004 年分別通報1,448、1,362、1,693、1,759 及1,341 例退伍軍人病例（共7,603 例），確定病例分別有63、40、77、108 及106 例（共394 例），每十萬人口確定病例數為0.28、0.18、0.34、0.48 及0.47[4]。　　　冷卻水塔、飲水機、蓮蓬頭、水龍頭池水　　　生物資源保存及研究中心ATCC 編號33823 Legionella pneumophila之冷凍乾燥管，於2~8℃保存，以作為本實驗之正控制組。　　　　　　 生物資源保存及研究中心BCYE-α agar（Acumedia,7307），放置於攝氏37度及5%二氧化碳培養箱培養，直至培養基上長出灰白色之菌落，將長出之菌落再次接種至BCYE-α agar 得到第二世代菌落。將接種環紅滅菌，在平板培養基內側邊緣冷卻，沾少量第二世代菌落，以四區分畫法接種於BCYE-α agar 上以取得單一菌落。將單一菌落接種至保存液，共保存10 份，置於-80 ℃冷凍櫃，需要使用時取出一份使用。　 2.3 退伍軍人桿菌培養及計算菌液濃度　　　 3 mL滅菌水中，震盪混合均勻後，作為後續實驗之原始菌液。　 若需正控制組退伍軍人桿菌培養時，取上述原始菌液做若干倍稀釋後，獲得該實驗所需之起始菌液，在利用系列稀釋及培養方式可獲得起使菌液之濃度。其方法如下：從起始菌液中取出1 mL加入9 mL無菌稀釋液中，即可獲得10×稀釋菌液。再由10×稀釋菌液中取出1 mL加入9 mL無菌稀釋液中，即可獲得100 ×稀釋菌液。如此重複可以獲得100×、1,000×等稀釋菌液。分別從不同稀釋菌液取出0.2 mL，均勻塗抹在BCYE-α agar 上，每一個濃度需做三次重複。將塗抹完畢之BCYE-α agar 放至於攝氏37 度、5%二氧化碳培養3-5天後，取出計算其菌落。其菌液濃度計算方式可參考環保署所公告「水中總菌落數檢測方法—塗抹法（NIEA E203.52B）」。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 圖　 圖　　　圖飲用水　　　　　　呂旭峰陳媛孃李美慧黃志堅薛樹清”溯談退伍軍人”症，感染控制雜誌第12卷第2期”台灣溫冷礦泉研究”，衛生署疾病管制局科技研究發展計畫成果報告　　　”台灣地區消費者對退伍軍人菌覺知與溫泉消費行為之研究”，國立高雄師範大學環境教育研究所，碩士論文。　 [4].衛生署疾病管制局，2006，”退伍軍人病”，法定傳染病。　　 [5].環境保護暑，1997，”飲用水水源水質標準”。