不同部位来源的牙周膜干细胞成骨能力的动物实验分析-animal experimental analysis of osteogenic ability of periodontal ligament stem cells from different parts.docxVIP

缩略词缩略语表英文全称中文全称ASCs PDLSCs PDLCSsPDLadult stem cellsperiodontal ligament stem cells periodontal ligament cellsperiodontal ligament成体干细胞 牙周膜干细胞 牙周膜细胞牙周韧带a-PDLSCsalveolarbonesurfaceperiodontal ligament stem cellsr-PDLSCsroot surface periodontal ligament stem cells牙槽窝表面牙周膜干 细胞牙根表面牙周膜干细 胞GTRguided tissue regeneration引导组织再生BMSCsbone marrow stromal cells骨髓基质干细胞GFgingival fibroblast牙龈成纤维细胞ECMextracell matrix细胞外基质BMPbone morphogenetic protein骨形成蛋白ALPalkaline phosphatase碱性磷酸酶CBBCeramic bovine bone陶瓷骨α-MEMAlpha Modified Minimum Essential Mediumα-MEM 培养基PBSphosphate buffered saline磷酸盐缓冲液HEHematoxylin and Eosin Staining苏木素伊红染色PDGFplateletderived growth factor,血小板衍化生长因子碱性成纤维细胞生长bFGFbasic fibroblast growth factor因子SPFspecific-pathogen free无特定病原体ADSCsadipose tissue derived stromal cells脂肪基质细胞ESembryonic stem cell胚胎干细胞不同部位来源的牙周膜干细胞成骨能力的动物实验研究博士研究生 ：沈焕导师 ：段银钟教授 金岩教授第四军医大学口腔医院正畸科，西安 710032中文摘要牙周病是牙周组织的一种感染性疾病，据统计，我国有2／3的人患有牙 周疾病，是40岁以上人群牙齿缺失的主要原因。它是发生在牙周支持组织的 疾病，包括牙龈，牙骨质，牙周膜，牙槽骨的吸收，破坏和丧失，而后期发 展为牙周病则会引起牙齿松动、移位，咀嚼无力甚至疼痛，最终导致牙齿的 脱落脱落和拔除。牙周病治疗的目标是去除牙周刺激因素，阻止进一步的牙 周附着丧失最终获得牙周软硬组织的再生，其中以牙槽骨的修复再生最为关 键。目前临床广泛使用的引导组织再生术虽然对治疗牙周病有一定的积极意 义，可是还不能够使牙周组织得到完全修复和再生,缺损部位的组织进行自 身修复能力有限。如何实现有效的牙周再生，是学着们一直追求的目标和努力的方向。利 用组织工程学研究组织再生的主要内容包括种子细胞的来源，生物载体支架 的选择以及微环境的构建等三个方面。其中种子细胞的优化选择研究是牙周 再生领域组织工程的重要内容之一。通过牙周膜中的不同细胞亚群的定向迁移和分化，牙周组织具有一定的 自我修复能力实现。近年来，Seo BM 等在健康成人牙周膜单细胞悬液中利用酶消化法分离得到具有形成细胞克隆能力和高度增殖能力的细胞，命名为牙周膜干细胞，为治疗牙周病提供了新的方法和思路。牙周膜是连接牙齿和 牙槽骨韧带组织，拔牙时牙周膜断裂，在牙齿和牙槽窝内都残留有牙周膜干 细胞。那么，拔牙后，牙根表面的牙周膜干细胞和牙槽窝内残留的牙周膜干 细胞否有所不同？他们对牙周再生的作用和效果是否一样？在应用组织工 程学的方法作为种子细胞进行牙周再生的时候，究竟什么位置的牙周膜干细 胞更加有效？对于这些问题的研究和回答，无疑将有助于为今后牙周组织再 生种子细胞的优化选择打下理论基础，进一步推动运用组织工程的方法治疗 牙周疾病的效果。本课题分两部分，前期主要涉及牙槽窝来源的牙周膜干细胞性质和特点 的体外鉴定，而本人主要是利用动物实验的方法研究关于牙槽窝来源的牙周 膜干细胞体内成骨能力。主要内容和结果如下： 1、人不同部位来源牙周膜干细胞裸鼠皮下成骨能力的研究首先是两种不同部位来源的 PDLSCs 的分离和培养。在拔牙后牙槽窝挂 取残留牙周膜组织，通过组织块加酶消化法，培养出牙槽窝表面牙周膜表面 牙周膜干细胞 a-PDLSCs（alveolar bone surface periodontal ligament stem cells）；用文献所述的方法，在拔牙后牙根中 1/3 段挂取牙周膜组织，同样 使用组织块加酶消化法，培养出牙根表面牙周膜干细胞 r-PDLSCs（root surface periodontal ligament stem cells）。