高血脂对大鼠脑缺血再灌注损伤后p38和mmp-9表达的影响-effect of hyperlipidemia on p38 and mmp - 9 expression after cerebral ischemia-reperfusion injury in rats.docxVIP

高血脂对大鼠脑缺血再灌注损伤后 p38 和 MMP-9 表达的影响摘要目的：高血脂合并脑缺血与单纯脑缺血后，检测不同再灌注时间点 p38 和 MMP-9 的表 达，观察高血脂对脑缺血再灌注损伤后 p38 和 MMP-9 表达的影响；检测使用 p38 抑 制剂 SB203580 后 p38 和 MMP-9 表达的变化，探索在脑缺血再灌注损伤过程中 p38 和 MMP-9 之间的作用。方法：SPF 级 SD 雄性大鼠 120 只高脂饲料喂养，98 只普通饲料喂养；高脂模型建立后， 采用 Zea-longa 线栓法建立脑缺血再灌注模型。分组为：假手术组（sham）、脑缺血 再灌注组（IR）、高血脂合并脑缺血再灌注组（G+IR），每组又分六个亚组，分别为 缺血 2h 再灌注 2h、6h、12h、24h、48h、72h；高血脂大鼠分 4 组，假手术并给予 SB203580 组、假手术并给予 DMSO 组、缺血 2h 再灌注 24h 并给予 SB203580 组和缺血 2h 再灌 注 24h 并给予 DMSO 组。在相应时间点处进行神经行为学评分及 TTC 染色判断模型 成功与否。采用 EB 染色检测血脑屏障通透性、Nissl 染色观察神经元形态、免疫组化 及免疫印迹法检测 p38 和 MMP-9 表达、RT-PCR 检测 MMP-9 mRNA 量。结果：与假手术组比较，高血脂合并脑缺血再灌注组和单纯脑缺血再灌注组神经行为学 评分升高，P0.05。G+IR 组较 IR 组神经行为学评分明显升高，P0.05。TTC 染色结 果显示：G+IR 组较 IR 组梗死灶体积扩大，P0.05；且再灌注 24h 时梗死灶体积达峰 值。EB 染色结果显示：与 sham 组比较，IR 组和 G+IR 组脑组织中 EB 含量均明显升 高，P0.05；且 G+IR 组较 IR 组脑组织中 EB 含量明显增多，P0.05；再灌注 24h 时 EB 含量最高。Nissl 染色显示神经元形态，G+IR 组和 IR 组细胞形态改变，结构疏松 紊乱，尼氏体边集、降解。免疫组化及免疫印迹检测 p38 和 MMP-9 表达，两者在再 灌注 2h 时表达开始增加，且随再灌注时间延长表达量逐渐增加，再灌注 24h 时达峰值，随后又逐渐降低；G+IR 组较 IR 组 p38 和 MMP-9 在各灌注时间点表达量均明显升高，P0.05。与给予 DMSO 的组比较，SB203580 抑制剂组 p38 和 MMP-9 表达量 均明显降低，P0.05；同时梗死灶体积明显缩小，EB 含量明显降低，神经行为学评 分也较 DMSO 组明显降低，P0.05。结论：高血脂通过上调 p38 和 MMP-9 而加重脑缺血再灌注损伤；在脑缺血再灌注损伤 过程中 p38 和 MMP-9 表达变化一致，抑制 p38 表达后 MMP-9 表达也降低，p38 可能 间接调节 MMP-9 的表达，共同发挥作用参与血脑屏障的破坏。关键词：高血脂；脑缺血再灌注；p38；MMP-9The Effect of Hyperlipidemia on Expressions of p38 and MMP-9 after focal Cerebral Ischemia-Reperfusion in RatsAbstractObjective:To detect expressions of different reperfusion points of p38 and MMP-9 and observe the effect of hyperlipemia on expressions of p38 and MMP-9 following cerebral ischemia-reperfusion combined with hyperlipemia or simple cerebral ischemia-reperfusion. To test changes of expressions of p38 and MMP-9 after using p38 inhibitor SB203580, explore the interaction between p38 and MMP-9 during the process of cerebral ischemia reperfusion injury and study the mechanism which hyperlipemia aggravate cerebral ischemia reperfusion injury.Methods:120 SPF SD male rats were fed with high-fat diet, and 98 SD rats wer