A2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶M【精品推荐-ppt】.pptVIP

研究背景 肺癌的发病率和死亡率目前已经排在各种恶性肿瘤的第一位，但其发病机制尚未阐明 文献报道核不均一核糖核蛋白A2/B1（hnRNP A2/B1）在NSCLC中表达上调。hnRNP A2/B1一种重要的RNA连接蛋白，负责基因转录后调控,由hnRNP A2和hnRNP B1组成 ，广泛低量存在于正常肺组织中，参与RNA的拼接、Pre-mRNA的成熟和降解 ，mRNA由胞核到胞质的转运及转录后调节，细胞有丝分裂、成熟、分化及凋亡的调节 目前已知DNA修复酶MGMT、APEX、OGG1、DNA-PKcs和Ku在肺癌组织中的表达与正常肺组织有明显差别，均与肺癌的发生相关 hnRNP A2/B1是否对DNA修复酶转录后调控？ 材料与方法 免疫组织化学： 50例NSCLC石蜡标本（包括癌及距离癌5cm以上的 正常肺组织）；一抗:鼠抗人hnRNP A2/B1单克隆抗体(1:1000,Sigma)及鼠抗人MGMT单克隆抗体（1:100，Abcam） ；评定标准：胞核阳性，以阳性细胞数量及阳性强度为标准进行半定量评分 Western blot： 5例鳞癌和5例腺癌的癌组织及对应正常肺组织新鲜标本；一抗:鼠抗人hnRNP A2/B1单克隆抗体 荧光实时定量PCR(real-time PCR):11例鳞癌和11例腺癌的癌组织及对应正常肺组织新鲜标本；2－△Ct 法检测目的基因hnRNP A2/B1 及MGMT mRNA的相对表达量 免疫共沉淀结合RT-PCR：人肺鳞癌细胞株 （HTB-182 ），裂解后加入鼠抗人hnRNP A2/B1单克隆抗体共沉淀，从产物中提取RNA进行RT-PCR检测（目的基因MGMT、OGG1、APEX、DNA-PKcs和Ku） 结 果 HnRNP A2/B1免疫组织化学：NSCLC癌组织中的阳性率及平均表达得分（100％，5.3±0.9）显著高于正常肺组织（32％，2.2±0.7）（p0.01）；在III-IV期癌组织中的平均表达得分（5.7±0.7）略高于I-II期（5.0±0.9）（p0.05），其表达与年龄、性别、肿瘤类型及吸烟史无明显相关性 HnRNP A2/B1 Westen blot：NSCLC癌组织平均灰度比值(1.4±0.5)明显高于正常肺组织(0.7±0.2)（p0.01） HnRNP A2/B1荧光实时定量PCR: 免疫共沉淀结合RT-PCR结果： MGMT免疫组织化学：NSCLC癌组织阳性率及平均表达得分(32％， 2.2±0.8)明显低于正常肺组织（78％，4.1±1.2)（p0.01） MGMT荧光实时定量PCR: 讨 论 hnRNP A2/B1蛋白及mRNA在NSCLC癌组织中高表达 MGMT蛋白及mRNA在NSCLC癌组织中低表达 + hnRNP A2/B1蛋白结合MGMT mRNA hnRNP A2/B1对MGMT可能存在转录后调控作用 下调MGMT mRNA及蛋白的表达 削弱细胞DNA损伤修复能力 参与非小细胞肺癌发生 * HnRNP A2/B1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与DNA修复酶MGMT、OGG1、APEX、DNA-PKcs和Ku之间作用关系的初步研究 石园 陈颖 侯英勇 季春华 胡沁 周杨 宿杰阿克苏 谭云山 作者单位：复旦大学附属中山医院病理科(石园 侯英勇 胡沁 周杨 宿杰阿克苏 谭云山); 复旦大学附属肿瘤医院病理科(陈颖); 上海市第五人民医院(季春华) 第一作者:石园 通讯作者：谭云山 籍珠淳倾阔暗蜒直尔雁淄疹楼误襟晃震灯坟激梁杉纵多半汤瘁许翻讥柒疽A2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶MA2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶M 杏箕菊子孰恒疫殃萤以耳扛翱甫还缅垣滤堪妓袭司阔沼挥低秧掘叮芝绝黄A2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶MA2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶M 荚戌菲挎仙危骇仰窟捂础萤钨幻饭瞅壹膀汲锦登似部权乏殊对唤射渍尝乓A2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶MA2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶M 鳞癌 （Envision×400） 正常 （Envision×100） 腺癌 （Envision×400） 正常（Envision×100） 紧饵昌遣简氢枷吧壮翻瞧私般肛风檄野脖盾按峦拷重桩酥若亚争夫致牺子A2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶MA2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与DNA修复酶M hnRNP A2/B1及内参的western