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生物化学检验常用分析技术--PPT
生物化学检验常用技术 ;第一节光谱分析技术;一、吸收光谱分析法;
该公式表明，当用一束单色光照射吸收溶液时，其吸光度与液层厚度及溶液浓度的乘积成正比。此即朗伯-比尔定律。在朗伯-比尔定律中，比例常数k称为吸光系数。
如果溶液浓度以物质的量的浓度表示时，此常数称为摩尔吸光系数（ε），它表示在一定波长下测得的液层厚度为1cm、溶液浓度c为1mol/L时的溶液吸光度值。
如果溶液浓度以质量体积比表示时，此常数称为比吸光系数（ ），它表示当溶液浓度为1g/L、液层厚度为1cm时，在一定波长下测得的吸光度值。摩尔吸光系数ε和比吸光系数 可相互换算。
;、Lambert-Beer定律的应用条件：Lambert-Beer定律适用 可见光、紫外光和红外光；适用均匀非散射的液态样品，固体气态等
Lambert-Beer定律要求条件
1、入射光必须是单色光
2、被测样品必须是均匀介质
3、吸收过程中，吸收物质之间不发生相互作用;4、Lambert-Beer定律的偏离现象;紫外-可见分光光度法的原理 ;; 物质颜色和吸收光颜色的关系
吸 收 光 物质颜色 颜 色 波 长(nm) 黄 绿 紫 400 ~ 450 黄 蓝 450 ~ 480 橙 绿 蓝 480 ~ 490 红 蓝 绿 490 ~ 500 紫 红 绿 500 ~ 560 紫 黄 绿 560 ~ 580 蓝 黄 580 ~ 600 绿 蓝 绿 600 ~ 650 蓝 绿 红 650 ~ 750
; 物质的结构决定了物质在吸收光时只能吸收某些特定波长的光。我们可以利用测量物质对某种波长的光的吸收来了解物质的结构特性。
用经过分光后的不同波长的光依次透过该物质，通过测量物质对不同波长的光的吸收程度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，就可以得到该物质在测量波长范围内的吸收曲线。这种曲线体现了物质对不同波长的
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