第11篇RNA的生物合成-ban.pptVIP

第11章;在生物界，RNA合成有两种方式：;转录 (transcription) 是生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 ;;复制和转录的区别;参与转录的物质：;原核生物转录的模板和酶 Templates Enzymes in Prokaryotic Transcription;一、原核生物转录的模板;5′···GCAGTACATGTC ···3′;5? 3?;二、RNA合成由RNA聚合酶催化;;（二）RNA聚合酶由多个亚基组成;核心酶 (core enzyme);三、RNA聚合酶结合到DNA的启动子上起动转录;;RNA聚合酶保护法;开始转录;RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合:;;原核生物的转录过程 The Process of Transcription in Prokaryote;RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。;2. DNA双链局部解开，形成开放转录复合体(open transcription complex) ；;E.coli的转录起始和延长 ;第一个磷酸二酯键生成后，σ亚基即从转录起始复合物上脱落，核心酶连同四磷酸二核苷酸，继续结合于DNA模板上，酶沿DNA链前移，进入延长阶段。 ;二、 转录延长;转录空泡(transcription bubble)：;转录延长：;5?;依赖Rho 因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止;ρ因子是由相同亚基组成的六聚体蛋白质，亚基分子量46kD。 ρ因子能结合RNA，又以对poly C的结合力最强。 ρ因子还有ATP酶活性和解螺旋酶(helicase)的活性。;ρ因子的作用原理：;ρ因子的作用原理：;;（二） 非依赖 Rho因子的转录终止;5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` ;茎环结构使转录终止的机理：;;真核生物的转录过程 The Process of Transcription in Eukaryote;;一、 真核生物有三种DNA依赖性RNA聚合酶;真核生物的RNA聚合酶;;二、转录起始需要启动子 、RNA聚合酶和转录因子的参与;;;;转录起始点;（二） 转录因子;参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ;RNA聚合酶II与启动子的结合、启动转录需要多种蛋白质因子的协同作用。通常包括： 可诱导因子或上游因子与增强子或启动子上游元件的结合； 通用转录因子在启动子处的组装； 辅激活因子和/或中介子在通用转录因子/RNA聚合酶II复合物与可诱导因子、上游因子之间的辅助和中介作用。 因子和因子之间互相辨认、结合，以准确地控制基因是否转录、何时转录。;Ⅱ型基因中的四类转录因子 ;真核生物RNA聚合酶Ⅱ转??的基因及其转录起始上游序列;（三） 转录起始前复合物;PIC的形成;;（四）少数几个反式作用因子的搭配启动特定基因的转录;三 、真核生物转录延长过程中没有转录与翻译同步的现象;RNA-Pol;四、真核生物的转录终止和加尾修饰同时进行;真核生物的转录终止及加尾修饰;真核生物RNA的加工 Post-transcriptional Modification of Eukaryotic RNA;;几种主要的修饰方式：;一、真核生物mRNA的加工包括首、尾修饰和剪接;帽子结构：;5? pppGp…;;帽子结构的意义：;（二）前体mRNA在3’端特异位点断裂并加上多聚腺苷酸尾 ;;AAUAAA;真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 ;2. 外显子(exon)和内含子(intron) ;鸡卵清蛋白基因;鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图;3. 内含子的分类 ;4. mRNA的剪接;②;pG-OH (ppG-OH, pppG-OH);? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。;二、tRNA的转录后加工;RNAaseP、内切酶;tRNA核苷酸转移酶、连接酶;碱基修饰;三、rRNA的转录后加工;四、核 酶;四膜虫rRNA内含子的二级结构;最简单的核酶二级结构——槌头状结构 (hammerhead structure);核酶研究的意义;人工设计的核酶