盐酸川芎嗪凝胶剂制备及体外透皮性能研究.docVIP

盐酸川芎嗪凝胶剂制备及体外透皮性能研究 　　[摘要] 制备盐酸川芎嗪凝胶剂并研究其体外经皮渗透性。采用Valin-Chien双室渗透扩散池，以大鼠离体皮肤为渗透屏障，以HPLC测定川芎嗪含量，考察含药量、薄荷油、月桂氮NFDB3酮用量对盐酸川芎嗪凝胶剂经皮渗透性的影响。凝胶剂处方的最佳组合：5%月桂氮NFDB3酮+5%薄荷油+8%羧甲基纤维素钠+8%盐酸川芎嗪，12 h累积渗透量平均值为（6 731.87±102.31） μg·cm-2，渗透速率平均值为（535.02±33.89） μg·cm-2·h-1，其体外经皮渗透近似零级过程。盐酸川芎嗪凝胶剂具有较好的经皮渗透特性，有望成为新的给药制剂。 　　[关键词] 川芎嗪；凝胶；薄荷油；月桂氮NFDB3酮；经皮渗透 　　川芎嗪（tetramethylpyrazine， TMP）是从伞形科植物川芎或姜科植物温莪术的根茎等部位提取的中药有效成分，属生物碱类，易透过血脑屏障，已证实对缺血性脑血管病具有良好疗效[1-6]，从20世纪70年代中期以来，已成为国内用于脑缺血性脑血管病的常用药物。近年有研究表明其对血管性痴呆也有良好的作用[7-9]。目前，临床上常用的剂型有片剂、胶囊、注射剂。口服途径肝脏首过效应明显，注射剂给药时易引起局部疼痛、急性毒性、过敏反应[10]。而且川芎嗪半衰期短，普通制剂给药代谢快，需频繁给药，血药浓度会有较大的波动，峰谷现象明显。尤其对于老年人这类心脑血管病高发人群，“峰谷”现象更容易导致危险，对药物的平稳释放要求也更高。近年来，有学者将其制备成脂质体型以及微乳型控释经皮给药，但上述经皮制剂存在不足，难以实现工业化生产。本研究将川芎嗪制成工艺简单的经皮给药凝胶，通过体外经皮渗透对处方进行了筛选。 　　TMP临床常用的药物形式是盐酸川芎嗪[11]（tetramethylpyrazine hydrochloride，TMPH）和磷酸川芎嗪（tetramethylpyrazine phosphate，TMPP）。本研究以TMPH为主药制备凝胶，以TMP为检测药物，研究TMP体外透皮性能，为开发新制剂提供依据。 　　1 材料 　　日本岛津 LC-20AT高效液相色谱仪，SPD-20A紫外检测器，浙大 N2000色谱工作站（浙江大学智能工程研究所）；Valia-Chien双室渗透池（自制）；超级恒温循环仪（德国 HAAKE）；TGL-16C台式离心机（上海安亭科学仪器厂）。 　　TMP（含量99%，南京泽朗医药科技有限公司，批号ZL201101011A）；TMPH（含量99%，南京泽朗医药科技有限公司，批号ZL201205010A）；月桂氮NFDB3酮（广州精细化学工业公司）；薄荷油（安吉市青原区恒诚天然香料油提炼厂）；羧甲基纤维素钠（国药集团化学试剂有限公司）；甲醇（色谱纯，上海陆都实业有限公司）；其他试剂均为分析纯。 　　2 方法 　　2.1 凝胶的制备 　　TMPH加蒸馏水溶解，加入月桂氮NFDB3酮和薄荷油适量，最后加入羧甲基纤维素钠充分溶胀后，使之成凝胶，搅匀即得。 　　2.2 盐酸川芎嗪的体外经皮渗透实验 　　2.2.1 离体大鼠皮肤的制备 取体重250～300 g的雄性SD大鼠（浙江省医学科学院实验动物中心），处死后，用电动剃须刀剃毛。剥离背部皮肤，仔细剔除皮下脂肪和粘连物，剪成适当的大小，-20 ℃保存，使用前自然解冻。 　　2.2.2 体外透皮实验 将解冻后的大鼠皮肤用生理盐水浸润，滤纸吸干。绷于Valian-Chien双室渗透池的两室之间，真皮层面向接受室，角质层面涂上凝胶，外加一层保护膜，并用弹簧夹把双室的双口固定，在接受室中加入生理盐水4 mL。控制渗透池夹层内水温在（32±0.5） ℃，池内放星状搅拌子1粒，电磁搅拌转速500 r·min-1。每隔1 h从接受室吸取渗透液1 mL，后将接受室内的液体吸干，再补加生理盐水4 mL，直至12 h。将取得的待测液以1万 r·min-1离心5 min后，以HPLC测定含量。 　　2.3 川芎嗪含量测定 　　2.3.1 色谱条件 Dikma Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相甲醇-水（55∶45），流速1.0 mL·min-1；检测波长281 nm；柱温35 ℃；进样量20 μL。 　　2.3.2 标准曲线的制备 精密称取TMP对照品25.35 mg，置50 mL量瓶中，用甲醇溶解至刻度，制成507 mg·L-1的对照储备液。用0.9%氯化钠溶液逐步稀释制得质量浓度为3.96，7.92，15.84，31.69，63.38，126.75，253.50 mg·L-1的对照溶液（n=5）。 　　2.4 数据处理 　　样品按照2.3.1项下方法进行含量测定，计算单位时