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液相色谱法在食品添加剂检测中应用探析 　　摘 要：随着生活质量的不断提高，人们在消费时越来越重视产品的质量，尤其是关注所食用的食品，对于食品添加剂的添加问题越来越关注，世界范围内要求食品安全的呼声越来越高，因而对于食品添加剂的检测方法也备受关注。本文对食品添加剂检测方法中的液相色谱法进行了相关论述。 　　关键词：液相色谱法；食品添加剂；检测；应用 　　随着人类食品加工行业的发展，且由于生活节奏及工作压力的逐渐增强，人类越来越依赖加工的食品，为了提高食品的口感、食品的货架保质期等各种原因，使得食品添加剂已成为必不可少的一种物质，但食品添加剂作为化学物品总会对人类身体健康产生副作用。近几年，随着人们对食品卫生及安全质量意识的提高，人们越来越关注食品添加剂的检测问题，因而使用恰当而精确的检测方法已经成为食品检验行业所面临的重大课题。作为食品检测方法一种的液相色谱法主要是用于检测防腐剂与甜味剂。因此，本文使用液相色谱法，并通过具体实验来验证在食品添加剂检测中的具体情况。 　　一、液相色谱法在检测食品添加剂时所需物品及步骤 　　（一）检测使用的仪器、试剂 　　仪器：高效液相色谱仪（含紫外检测器）（美国戴安）、柱温箱（大连依利特） 　　试剂：甲醇（色谱级）（上海国药试剂）、实验室一级用水（成都艾柯超纯水仪，自制）、0.02mol/L的乙酸铵溶液。 　　标准物质：1.0mg/ml的苯甲酸标准储备液、1.0 mg/ml的糖精钠标准储备液（国家标准物质中心） 　　（二）样品准备 　　1.固体样品处理 　　首先，把样品粉碎，充分混合均匀之后，称取约5.0g的混合物转入50ml的比色管，在比色管中加入约20ml的水，待混合物充分溶解之后，用氨水（1+1），将溶液的pH值调至7.0，加水定容至50ml。采取离心沉淀，取上清液备用。如果是油脂含量高的样品，则先需要加入乙醚和石油醚（1+3）的混合物进行萃取，除去萃取液，再进行处理。 　　2.饮料样品处理 　　称重5.0g～10.0g的样品倒入小烧杯中，对它们进行加热，并且要不断的搅拌，使其二氧化碳除去。之后用氨水（1+1）将溶液的pH值调至7.0，定容相应的体积。必要时可进行离心操作。 　　将待测样品用0.45μm水系针桶式过滤器进行过滤，试样待测。 　　3.检测步骤 　　第一、设定条件 　　采用色谱柱：Kromasil C18（250mm×4.6mm，5μm），柱温箱温度：30℃，检测采用的波长：230nm，采用的流动相：甲醇+乙酸铵的混合溶液（0.02mol/1）（5+95），流动速度：1.0ml/min。 　　第二、测定一组标准溶液，绘制标准曲线 　　标准溶液的浓度分别为0.005、0.010、0.020、0.040、0.050mg/ml苯甲酸和糖精钠混合溶液系列，分别取样100uL（定量环体积为20μL）进行检测。根据它们不同的浓度和对照的峰面积值制定它们的标准工作曲线。 　　第三、测定样品 　　取经过滤膜过滤的液体100uL（定量环体积为20μL），进行检测分离，以它们标准溶液峰值的停留时间为根据，判断它们的性质，然后和峰值面积标准工作曲线进行比较，计算出样品检测的最后结果。 　　二、检测结果以及分析 　　（一）实验过程中的填料粒度的选择 　　可以选择粒径是5μm填料的C18柱，这两类物质可以在非常短的时间内快速分离。经过比较之后，可以发现在甲醇：乙酸铵溶液比例相同时，两类物质峰值出现的速度和时间都比较快，且分离效果较好。 　　（二）流动相的选择 　　在检测过程中，我们能够经过调整流动相中甲醇与乙酸铵（0.02mol/1）的比例，对相近的峰值也就是苯甲酸与糖精钠之间的分离度进行观察。试验证明.在增加甲醇含量的前提下，各个试验组的峰值的出现时间会提前，但是试验样品中存在未知成分的物质时，对两类物质在色谱柱上停留的时间要缩短一些，这样检测出来的峰值图形才比较好。我们进行多次试验之后发现，在甲醇和乙酸铵（0.02mol/L）比例为5：95时，它们分离的比较彻底，而且它们在色谱柱上停留的时间比较合适，因此我们选择甲醇和乙酸铵比例为5：95进行检测。 　　（三）流速问题分析 　　对它们的流速进行调整，观察看它们的分离。流速在0.4～1.5ml/min区间进行变化时，它们之间的峰值分离度会在10%之内变化.分离度和停留时间比较恰当。对柱压和分离时间进行综合分析之后，决定选择1.0ml/min的流速为分离检测时的流速。 　　（四）本实验测定线性范围和检出限 　　经过检测发现，当苯甲酸、糖精钠溶液浓度在0.005、0.010、0.020、0.040、0.050mg/ml时，它们的线性关系比较好，相应系数超过0.999。解其线性方程，苯甲酸得出：y=1.2407x-0.0874.r=0.9998；糖精钠得出：