实验一DNA、RNA的原位显示和膜通透性观察.pptVIP

人体显微形态学实验 人体显微形态学实验（一） 组织胚胎学（占70分） 细胞生物学（占30分） 人体显微形态学实验（二） 病理学 医学遗传学 人体显微形态学实验（一） 细胞生物学部分 (基础医学院细胞生物学与遗传学教研室) 教师：程志 电话　 邮箱：zcheng26@126.com 细胞生物学实验安排 1. DNA、RNA的原位显示及细胞膜通透性观察（14周） 2. 细胞器标本观察、线粒体活体染色（15周） 3. 酸性蛋白、碱性蛋白及过氧化物酶原位显示（16周） 实验一DNA、RNA的原位显示及细胞膜通透性观察 一、实验目的 1、了解原位显示细胞内DNA和 RNA的方法 2、理解细胞膜的选择通透性 二、实验内容 1、细胞内DNA和RNA的原位显示 2、细胞膜的选择通透性观察 （一）DNA和RNA的原位显示 1、实验原理 DNA和RNA因聚合程度的不同，可被甲基绿-哌洛宁混合染液染成不同的颜色。DNA聚合程度高，被甲基绿染成蓝绿色；RNA聚合程度低，被哌洛宁染成红色。 2、实验操作步骤 捣毁脑组织法处死蟾蜍，取心脏血制备蟾蜍血涂片，每位同学制备一片，要求血膜均匀而薄，充分晾干。 70%酒精固定5分钟。（染色缸内） 玻片晾干后，在甲基绿-哌洛宁混合染液中染色15分钟。 （染色缸内） 细水冲洗玻片正反面各1秒钟，吸水纸吸干或晾干后显微镜下低、高倍镜观察。 血涂片的制备流程 （二）细胞膜的选择通透性 1、实验原理 在等渗溶液中，血细胞膜对不同溶质通透性不同，溶质进入细胞的速度有差异。当溶质进入细胞后引起胞内渗透压升高，水分子进入导致细胞膨胀并破裂，发生细胞溶血。 血细胞发生溶血后，原来不透明的血细胞悬液会变成红色透明的血红蛋白溶液。不同溶质进入细胞的速度不同，它们诱导血细胞发生溶血的时间也不同，可以通过测量溶血时间来估计细胞膜对各种物质的通透性大小。 2、实验操作步骤 每支试管中加入0.5 ml 10%的兔血细胞悬液。 再分别加入4.5ml各种等渗溶液，混匀，观察溶血现象并记录溶血时间。至少三位同学配合，一人加溶液并混匀，一人观察溶血现象，一人计时间。 溶血现象的判断: 能否看清试管背后的字迹。 三 、实验报告 1. 绘图显示细胞中DNA、RNA的分布和颜色反应。 2.列表记录每种实验物质引起的细胞溶血时间，并分析是否溶血及溶血快慢的原因。 编号 等渗溶液 是否溶血 溶血时间 结果分析 1 乙醇 2 甘油 3 醋酸铵 4 氯化铵 5 草酸铵 6 硝酸钠 7 硫酸钠 8 氯化钠 9 葡萄糖 细胞溶血实验结果及分析 实验报告格式 ●实验题目 ●实验内容 ●实验结果：绘图或列表，讨论 请班干部安排做清洁的同学，并填写实验室运行记录。 谢谢！