分子生物学的基本操作幻灯片.pptVIP

第一章 分子生物学的基本操作; 分子生物学研究从20世纪中叶开始高速发展的最主要原因—— 现代分子生物学研究方法、特别是基因操作和基因工程技术的进步。;基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，使之进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持续稳定的繁殖和表达。;1.1 重组DNA发展史-------;1952年Hershey和Chase证实噬菌体DNA侵染细菌实验;2. 50年代揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半 保留复制机制,解决了基因的自我复制和世代交替问题；;Description of the structure of DNA;Conservative Model;3. 50年代末至60年代，相继提出了中心法则和操纵子学说,成功地破译了遗传密码，充分认识了遗传信息的流动和表达。;两大技术保证：;限制酶的发现——细菌的限制与修饰现象;;重组DNA实验中常见的主要工具酶;1972 - Paul Berg,; 仅仅能在体外利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶进行DNA的切割和重组远不能满足基因研究的需要。 DNA片段在体外不具备自我复制能力，要想得到足够量和足够纯度的DNA，必须将它们连接到具备自主复制能力的DNA分子上（载体上），并转入寄主细胞中进行繁殖。 这就是基因克隆，或分子克隆 。 ;分子克