淡竹叶红外光谱多级鉴定与分析.docVIP

淡竹叶红外光谱多级鉴定与分析 　　[摘要]以淡竹叶及其常见伪品鸭跖草药材红外图谱为依据，分别通过一维红外光谱分析，二阶导数光谱分析和二维相关红外光谱分析的多级鉴定，寻找淡竹叶及其伪品的差异。利用共有峰率和变异峰率2个指标，以11个批次淡竹叶红外图谱为依据，计算并建立共有峰率和变异峰率双指标序列，并对其红外图谱数据进行聚类分析，探讨各产地淡竹叶的相似度。结果表明，通过红外光谱多级鉴定，可有效区别淡竹叶及其伪品；通过双指标序列分析和聚类分析2种统计方法，分组结果趋势一致，可有效区分淡竹叶来源产区和品质差异。红外光谱法以其测定快速简便、所需样品量少，结果稳定可靠等特点，为中药真伪鉴别和药材掺假甄别，及其品质差异和产地归属等方面提供了一种快速可靠的新方法。 　　[关键词]淡竹叶；红外；二阶导数谱；二维相关光谱；双指标序列分析；聚类分析 　　《中国药典》2010年版一部[1]所记载的淡竹叶为禾本科淡竹叶Lophatherum gracile Brongn.的干燥茎叶，具有清热除烦、利尿等功效，用于热病烦渴、小便赤涩淋痛、口舌生疮。淡竹叶中含有黄酮、萜类、多糖、氨基酸等多种化学成分。现代药理学研究发现，淡竹叶中有机酸类、黄酮类和三萜类化合物有抑菌防腐的作用[2-3]，黄酮类物质具有保护缺血心肌[4]和保护拘束负荷引起小鼠急性肝损伤[5]的作用，多糖具有清除氧自由基的作用[6]。淡竹叶主要分布在我国华东、华南、中南及西南地区，以浙江杭州一带所产“杭竹叶”为优。据文献考证[7-9]，“鸭跖草”曾为“淡竹叶”的别名，且药材市场上也存在两者混用现象。 　　在淡竹叶质量评价的系统研究中，主要采用高效液相色谱法，该方法分析准确度高，但是对样本量有一定的要求，且操作过程繁琐，速度较慢。文献检索结果表明，在淡竹叶质量控制和品质评价中，尚无红外光谱技术研究的相关报道。 　　红外光谱技术多级鉴定[10-12]的方法用于中药材的真伪鉴定及其质量控制，具有宏观整体真实的优势。本实验采用红外光谱分析技术分别研究淡竹叶与其常见伪品鸭跖草，结合双指标序列分析[13-15]和聚类分析[16]方法，比较不同产地批次的淡竹叶，以期得到快速简便可靠的方法用于淡竹叶的质量控制。 　　1材料 　　1.1仪器设备和数据处理软件 　　IR100型傅里叶变换红外光谱仪（Therom Nicolet， USA），其光谱范围为4 000～400 cm-1，分辨率为4 cm-1，扫描累加次数为16次；扫描时消除H2O和CO2的干扰；WS 70-1型红外线快速干燥器（上海市吴淞五金厂）；YS-2型压片机（上海山岳科学仪器公司）；玛瑙研钵。 　　红外一维图谱由Encompass红外数据采集分析软件获得，谱图由OMNIC 8.0软件分析获得。二维相关图谱2Dshige version 1.3由 Shigeaki Morita （Kwansei-Gakuin University， 2004-2005）分析获得。聚类分析结果由PASW Statistics 18.0.0 （Polar Engineering and Consulting， 1993-2007）软件计算获得。 　　1.2样品来源及试剂 　　淡竹叶样品信息见表1，经南京中医药大学中药鉴定教研室吴启南教授鉴定为禾本科淡竹叶L. gracile，鸭跖草药材经南京中医药大学中药鉴定教研室吴启南教授鉴定为鸭跖草科植物鸭跖草Commelina communis Linn.的干燥地上部分。溴化钾（SP，国药集团试剂有限公司，批。 　　2方法 　　2.1供试品的制备 　　取干燥的淡竹叶原药材，除去杂质，粉碎过200目筛。伪品鸭跖草供试品制备方法同上。 　　2.2供试品的测定 　　采用KBr压片法。取适量KBr 于红外干燥箱中干燥3 h，取约100 mg KBr于玛瑙研钵中在红外灯下研匀，并除去水分。将KBr倒入模具中，抽真空压片，加压10 mPa，制成透明薄片，置红外分光光度计上于4 000～400 cm-1扫描空白片。取样品粉末约1～100 mg KBr中，在红外灯下研匀，自“倒入模具中”起操作，每个样品累积扫描16次。在室温下获得各样品的一维红外谱图，谱图用OMNIC 8.0软件进行分析。 　　2.3方法学考察 　　2.3.1 稳定性试验 取淡竹叶样品S3按2.2 项下方法，压片后置干燥器中，每0，1，2，3，4，5 h测定一次，所得红外光谱图基本一致，谱间相关系数分别为1.000 0，0.999 9，0.999 8，0.999 7，0.999 7，RSD为0.13%。结果表明样品在5 h之内基本稳定。 　　2.3.2 精密度试验 取淡竹叶样品S3按2.2 项下方法，压片后连续重复扫描5次，所得红外光谱图一致，进行相似度比较