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浅析减少食品微生物检验干扰因素 　　摘要：本文对如何减少食品微生物检验中干扰因素进行了分析。 　　关键词：食品微生物检验； 干扰因素； 　　引言：众所周知，现在是一个知识大爆炸的年代，人类对自身生存环境的要求越来越高，尤其对食品安全的关注越来越多，也越来越高。从事食品检验的工作人员应该具备相应的知识和操作技能，增强食品安全意识，能够本着为自己负责，为人类健康负责，具有热爱这一行业的良好态度。下面就工作中如何减少食品微生物检验的干扰做下分析。 　　1.贯彻无菌操作，防止人为污染 　　1.1拥有健全的无菌实验室及相关管理制度。 　　无菌实验室使用前和使用后须用紫外灯（如为室内悬吊紫外灯，应为30W，距操作平台1米左右）照射至少30min。杀菌后检验前，不得随意打开无菌室。事先将进无菌室操作所用工作服、发网，口罩、拖鞋等必需品放进无菌室缓冲间用紫外灯照射杀菌。无菌室传递窗内也应紫外照射。紫外灯2周清洁一次，保持紫外线良好穿透力。进入无菌室前，注意自身消毒，用肥皂洗手及腕关节以上部位，用75%酒精喷洒手心手背及腕关节以上部位，换好衣服，戴好发网和口罩，穿上拖鞋方可进入接种操作。 　　1.2准备器材 　　开启紫外灯前，将无法干热和湿热灭菌的器材提前放入传递窗口紫外照射至少30min。吸管、平皿、药匙事先清洗好晾干，放入金属桶内，吸管尖嘴朝下，实验操作时用手抽取吸管顶端，避免污染尖嘴；平皿倒置叠放，便于烘干平皿内水分，杀菌效果更好，盖好桶盖，桶盖与桶身通气孔对齐，放入干燥箱，于160-170℃，干燥1.5-2h，进行杀菌消毒。 　　干燥灭菌后，放置干燥箱内冷却。临用前，把通气孔关闭，取出灭菌桶，整理好后放到传递窗口。每次从传递窗口递拿东西都要及时关闭窗口。 　　1.3准备药品及高压锅的使用 　　目前，多数无菌试验所用药品是脱水干粉状的，按照说明书上相关比例配置，再分装，分装时注意瓶塞和试管塞用棉塞或带有通气孔的橡胶塞，不用实木塞和不带通气孔的橡胶塞，否则高压灭菌时，锅内压力变化，使容器内液体飞溅喷出，严重的造成锅的排气孔和排水管道堵塞，酿成事故。最后用纸包好容器口和塞子，扎紧。 　　高压灭菌锅的使用按说明书进行操作，灭菌时间和温度按药品说明书设置，一般要求121℃，高压灭菌15-20min。 　　注意：（1）高压锅使用前添加蒸馏水，至加热管以上2cm左右，太少会损坏加热管，且不能产生足够的蒸汽进行灭菌，当然也不能太多（2）锅内物品堆放应有缝隙，否则蒸汽不能通过，影响灭菌；（3）灭菌时间长短要适宜。太短，不很好的杀菌消毒；太长，破坏某些药品成分特性，如琼脂凝固性可能被破坏，影响药品使用，造成浪费；（4）加热后，及时排放冷气至压力降为0，关闭排气阀至达到灭菌所需温度再微微开启排气阀，此时温度压力不会有很大变化。冷气排除很重要，因空气膨胀压大于水蒸汽膨胀压，水蒸汽中含空气，同压力下，含空气蒸汽温度低于饱和蒸汽温度，影响灭菌；（5）灭菌结束后，排气速度不能太猛，否则倒立发酵管内易产生气泡，甚至锅内压力骤降，容器内药品压力大于锅内压力，产生压力差而冲出容器，或沾染塞子而发生污染，影响鉴定；（6）高压灭菌后，排气开盖，将冷却到60℃左右的药品取出，放进传递窗口。琼脂类药品， 放到45℃恒温箱中，使之不凝固。若棉塞脱掉或容器破损，应取出弃之。 　　采用高压灭菌原因：湿热蒸汽有潜热，灭菌效力强；菌体吸收水分，降低凝固温度；湿热穿透力比干热大。 　　1.4采集样品 　　1.4.1准备：根据所取样品类型和状态采取不同取样方法，取样工具提前灭菌；戴好发网和工作帽，穿上灭菌工作服，手、指甲及腕部清洗后，用50ppm次氯酸钠浸泡30s，清水冲洗干净，吹干，戴好橡胶手套，手套口包住衣袖口，用75%酒精喷洒手心手背。准备就绪开始取样。 　　要求：所取样品具有充分的代表性和一致性；整个过程必须无菌操作。 　　1.4.2过程：用经紫外照射，质量完好，干净卫生，未开封的PE袋装置样品。打开PE袋，用手捏住袋子的外侧由里往外翻，把里面无菌的一面翻到外面拿取样品，将样品和袋子一起退出，样品装到袋子里面。整个取样过程，袋子内侧不能触及除样品之外的任何部位，否则污染袋子，影响样品。最后在袋子上做好标记，挤压出袋中的空气，打好结，放入特制运输箱中， 　　取表面样品一般用涂抹法，现常用涂抹棒，具体操作按照说明书进行。注意：不能上下晃动瓶体，否则打开瓶盖上的塞子后液体会从里面冒出；塞子打开后不能反复关闭和打开，以防污染；取回后，如不能及时检验，应低温保存。 　　取空气落菌时注意，培养用琼脂要提前培养24h，选用无菌平皿。取样时门窗要关闭，人员不能随便走动，空气静止沉降5min。标记好所取位置，对角线的顶点要距离墙壁1m。盖好平皿带回实验室。 　　1.5接种样品或转移菌种 　　一个宗旨：