蛋白质与核酸含量.pptVIP

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2018-07-04 发布于湖北
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蛋白质与核酸含量.ppt

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蛋白质含量的测定方法一、凯氏定氮法用于Pro含量测定最经典的方法。它是根据Pro平均含氮量16%，因此只要测出样品的含氮量即可知含量。仪器： 1.安全管 2.导管 3.汽水分离管 4.样品入口 5.塞子 6.冷凝管 7.吸收瓶 8.隔热液套 9.反应管 10.蒸汽发生瓶定氮蒸馏装置试剂：所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制 1. 硫酸铜 2. 硫酸钾 3. 硫酸 4.2%硼酸溶液 5. 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份 0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 6. 40%氢氧化钠溶液 7. 0.025mol/L硫酸标准溶液或0.05mol/L盐二：福林酚法 FOLIN-酚试剂可以和游离的酪蛋白螯合，呈蓝色，可以通过OT检测，判断溶液中的游离酪蛋白含量。灵敏度高,重复性好.颜色深,析光度大. 三、双缩脲法试剂：四、紫外吸收法 Pro在280nm处有最大吸收峰，测定的适当浓度在0.1~0.5 ug/ml 试剂：五、BCA比色法在PH大于7时，Pro与Cu2+反应后再与BCA试剂生成紫色复合物，在562nm处有最大吸收值。试剂：六：染料结合法 Pro与考马斯亮兰的结合物在595nm处有最大吸收值。 * *