9-1遗传育种袁.ppt

第九章 微生物菌种选育 获得菌株途径 直接向菌株保藏机构索取： 美国典型菌株保藏中心（ATCC） 英国国家典型菌种保藏所（NCTC） 日本大阪发酵研究所（IFO） 中国微生物菌株保存委员会（CCCCM） 从自然界采集样品进行分离：土壤、水、动植物体、含有微生物的产品（酱油、酒醪、酸奶）等 第一节 新种分离与筛选 一、新种分离与筛选的原理 分布广 不同环境条件下微生物代谢类型、生理特性不同 自然条件下微生物混杂生长 菌株分离 将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开，并按照实际要求和菌株特性采取迅速、准确、有效的方法对它们进行分离、筛选，进而得到所需微生物的过程。 工业微生物产生菌分离筛选工作内容 一是从自然界分离所需要的菌株 二是把分离到的野生菌株纯化并进行代谢产物测定 二、菌株分离筛选的步骤 采样 增殖培养 分离 产物鉴别 采样前的准备工作 采样 土壤：了解土壤的特点 土壤类型 土层深度：5～25cm 土壤酸碱度 地理条件 季节条件：春季、秋季 采集土样方法 采样操作方法 记录：地点、土样知底、植被名称、时间等 根据微生物生理特点采样 营养类型 生理特性 特殊环境下采样 局部特殊环境 极端环境 增殖培养（富集培养） 当目标微生物数量较少时，根据微生物的生理特点设计一种选择性培养基，创造有利的生长条件，使目标微生物在最适条件下迅速生长繁殖，数量增加，变为优势种群，达到利于分离的目的。 富集培养原理 根据微生物所需的碳源、氮源、酸碱度、温度、需氧情况等加以控制 富集培养方法 控制培养基的营养成分 控制培养条件 抑制不需要的微生物 微生物的分离 稀释涂布法 划线分离法 组织分离法 利用平皿的生化反应进行分离 透明圈方法 变色圈方法 生长圈方法 抑菌圈方法 产物鉴别 初筛 平板筛选 摇瓶发酵筛选 复筛 第二节 遗传变异的物质基础 一、遗传与变异 遗传：是指亲代传递给子代一整套遗传信息的能力。 变异：是指生物体在外因或内因的作用下，引起遗传物质结构或数量改变的现象。 二、一些概念 遗传性（基因型）：是指某一生物个体所含有的全部遗传信息的总和。 表现型（表型）：是指某一生物体所具有的一切外表特征和内在特征的总和，是遗传性在一定条件下通过代谢和发育而得到的具体体现。 表现型＝基因型+环境条件 饰变：是指不涉及到遗传物质改变，而只发生在表现型的改变。 三、证明遗传物质是核酸的3个经典实验 肺炎链球菌转化实验 噬菌体感染实验 TMV的拆建实验 转化实验 遗传物质在微生物细胞中的存在形式 细胞水平 细胞核水平 染色体水平 核酸水平 基因水平 密码子水平 核苷酸水平 基因及基因表达产物的表示方法 p196 原核生物的质粒 概念：是指游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dsDNA分子。 结构：超螺旋结构 严紧型质粒与松弛型质粒； 质粒消除 整合：是指质粒（或温和噬菌体、病毒、转化因子）等小型非染色体DNA插入核基因组等大型DNA分子中的现象。 质粒的种类 存在F质粒的细菌 E. coli Pseudomonas Haemophilus Neisseria Streptococcus 细菌素 由细菌产生的能够产生抑制或杀死其它近缘细菌或同种不同菌株的代谢产物。 Ti质粒（诱癌质粒、冠瘿质粒） Ri质粒 发根土壤农杆菌（A. rhizogenes）侵入双子叶植物的根部，并诱导生成大量的发状根。 第二节 基因突变和诱变育种 基因突变 概念：是指细胞内（或病毒粒子内）遗传物质的分子结构或数量发生的可遗传的变化。（突变） 狭义的突变指基因突变（点突变） 广义的突变指基因突变和染色体畸变 野生型菌株： 突变株： 突变的类型 营养缺陷型突变株： 抗性突变株 条件致死突变株 温度敏感突变株（Ts突变株） 形态突变株：个体、菌落（群体） 抗原突变株 产量突变株 正突变株、负突变株 突变率 概念：是指某一细胞（或病毒粒）在每一世代中发生某一性状突变的几率。 基因突变的特点 自发性 不对应性 稀有性 独立性 可诱变性 稳定性 可逆性 有害、有益性 证明基因突变自发性和不对应性的实验 变量试验（波动试验、彷徨试验） 涂布试验 影印平板培养法试验 基因突变的机制 诱发突变（诱变） 自发突变 诱变 概念：是指通过人为的方法，利用理化、生物因素提高基因突变率的手段。 诱变剂：指具有诱变效应的因素。 诱变机制 碱基的置换－微小的损伤（点突变） 转换 颠换 引起碱基置换诱变剂及机理p208 移码突变（码组移动突变） 概念： 移码突变株 引起移码突变的诱变剂 染色体畸变 DNA大的损伤 缺失、重复、倒位、易位－染色体结构变化 染色体数目变化 转座： 转座因子：插入序列（IS）、转座子（Tn）、转座噬菌体（Mu噬菌体） 自发