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基本形态
基本形态 绿色荧光蛋白分子的形状呈圆柱形，就像一个桶，负责发光的基团位于桶中央。因此，GFP可形象地比喻成一个装有色素的“油漆桶”。装在“桶”中的发光基团对蓝色光照特别敏感。当它受到蓝光照射时，会吸收蓝光的部分能量，然后发射出绿色的荧光。 GFP分子结构 GFP由238个氨基酸分子组成，分子量为26.9 kDa。 来源于水母的野生型GFP在395 nm和475 nm分别有主要和次要的激发峰，它的发射峰在509 nm，处于可见光谱的绿色区域；来源于海肾的GFP只在498 nm有单个激发峰。 GFP是典型的β桶形结构，包含β折叠和α螺旋，将荧光基团包含在其中。严密的桶形结构保护着荧光基团，防止它被周围环境淬灭，内部面向桶形的侧链诱导Ser65–Tyr66–Gly67三肽环化，导致荧光基团形成。 当蛋白质链折叠时，这段被深埋在蛋白质内部的氨基酸片段，得以“亲密接触”，导致经环化形成咪唑酮，并发生脱水反应。但此时还不能发射荧光，只有当有分子氧存在的条件下，发生氧化脱氢，方能导致绿色荧光蛋白发色团的“成熟”，形成可发射荧光的形式。 生色基团 GFP的生色基团由位于第65~67位的3个氨基酸:丝氨酸-脱水酪氨酸-甘氨酸形成的对羟基苯咪唑啉酮(4-p-hydroxybene-5-imidazolinone)构成 生色基团通过Tyr66的脱质子状态(酚盐)和质子化状态(酚羟基)的转换决定荧光发射.由于酚的激发态酸性远大于其基态,故仅脱质子态的结构发射荧光. 利用这一性质，生物学家们可以用GFP来标记几乎任何生物分子或细胞，然后在蓝光照射下进行显微镜观察。原本黑暗或透明的视场马上变得星光点点——那是被标记了的活动目标。对生物活体样本的实时观察，在GFP发现和应用以前，是根本不可想象的。而这种彻底改变了生物学研究的蛋白质 * 发光机理 *
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