加速溶剂萃取—固相萃取小柱净化—气相色谱法.doc

PAGE PAGE 8【环科园地】◆ 加速溶剂萃取—固相萃取小柱净化—气相色谱法测定土壤中12种有机磷农药的方法研究………………李月娥， 孙欣阳，顾海东，朱剑禾（苏州市环境监测中心站）农业生产过程中，大量施用农药造成了对土壤的污染。目前，在我国，有机磷杀虫剂销量占所有农药销售量的70%以上[1]。有机磷农药(OPPs)，是用于防治植物病、虫、害的含有机磷农药的有机化合物。其中，不少品种对人、畜的急性毒性很强。采取科学有效的手段检测土壤中的有机磷农药残留对土壤治污有着重要的意义。目前，土壤中的有机磷的提取方法有国标法、超声提取、索氏提取等。国标法操作步骤相对繁琐；超声波提取效率较低，结果不能真实反应土壤的污染状况；索氏提取时间长，容易造成目标组分的分解，且有机试剂消耗量大，产生二次污染。再者，土壤样品基体复杂，选择合适的净化方法很关键，文献报道的常用方法有凝结法[2]和佛罗里硅土净化法[3]等。本实验采用加速溶剂萃取法提取土壤中的12种有机磷农药，并通过选择佛罗里硅土和硅胶2种填料的SPE小柱及不同洗脱溶剂组合进行净化方案的比较优化，推荐了以硅胶为填料、混合溶剂（正己烷:丙酮:二氯甲烷＝1:1:1）洗脱的净化方案，利用色谱分析技术实现了在20分钟内将12种组分快速、良好的色谱分离。该方法自动化程度高，减少了萃取时间和试剂用量，净化回收率令人满意。同时，对环境的污染和人体的危害程度小，操作简便，灵敏度高，检出限低，精密度和准确度可靠，为土壤治污工作者和实验室分析人员提供科学的参考依据。1 实验部分1.1 仪器和设备气相色谱仪 ：Agilent 7890A 配置液体Agilent 7693自动进样器。加速溶剂提取仪：美国DIONEX ASE-300型, 配置33mL、66 mL、100mL萃取池。自动氮吹浓缩仪： Caliper TurboVapⅡ。色谱柱：DB-1701，30m×0.32mm×0.25μm。1.2 标准和试剂材料无水硫酸钠：优级纯，在400°C烘烤4小时,干燥器内冷却后使用。正己烷 ，丙酮，二氯甲烷，乙酸乙酯：TEDIA COMPANY,光谱纯。硅胶小柱：Agilent1g,6mL；佛罗里硅土小柱：Supelco,57057,1g,6mL。玻璃毛：Supelco，农残级（惰性化）。载气：氮气，纯度大于99.999％。标准物质：12种有机磷混标（甲拌磷、二嗪农、乙拌磷、、异稻瘟净、乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、马拉硫磷、对硫磷、稻丰散、丙溴磷、乙硫）,浓度200μg/mL，介质正己烷，AccuStandard S10443－R2,Lot:210051209,有效期2012.5.26。1.3 样品预处理1.3.1称取适量样品(视干湿状态)于洁净的研钵中，加入硅藻土,混匀，使之呈均匀分散状态，装入预先铺有2cm厚度无水硫酸钠层的66mL萃取池中。所用溶剂为正己烷和丙酮的混合溶剂(正己烷:丙酮＝9:1,V/V), 80℃,1500psi,加热5min，静态5min，循环3次，ASE收集瓶中萃取液待脱水、浓缩和1.3.2 脱水在层析管底部塞入少许玻璃纤维，装入6cm左右厚度的无水硫酸钠，预先用正己烷和丙酮混合溶剂淋洗，弃去。将提取液过层析柱，用150mL专用氮吹浓缩管收集，并用15mL混合溶剂分3次洗荡ASE收集瓶，合并过无水硫酸钠柱。1.3.3 浓缩浓缩管置于氮吹浓缩仪中，于35 ℃水浴中氮吹至0.75mL左右 ，取下氮吹管，立即用少量正己烷冲洗管壁，加至浓缩管的2-3mL 处。重复2-3次，最终定容至1.0mL 。1.3.4 净化对用作净化的SPE小柱进行预先用溶剂淋洗活化，再将浓缩液上样，用氮吹浓缩管收集洗脱液，再次浓缩定容至1.0mL，供色谱分析用。1.4 气相色谱仪条件汽化室：240柱温程序：80℃ (1min)15℃/min200℃(3min) 柱流量：1.2 mL/min检测器：火焰光度检测器（FPD，磷滤光片），250℃； 氢气：75 mL/min;空气100 mL/min，氮气尾吹601.5 标准曲线的绘制1.5.1 标准中间溶液的配制用100μL微量注射器准确吸取100μL浓度为200μg/mL的标准贮备液于一只干燥洁净的10mL容量瓶中。用正己烷稀释至刻线，定容，摇匀。该混合溶液中各组分的浓度为2.0μg/mL。1.5.2 标准系列工作溶液的制备分别取适量的上述有机磷农药混合标准中间溶液，配制成浓度为0.000mg/L 0.010mg/L、0.020mg/L、0.050mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、0.500mg/L和1.000mg/L的一系列标准工作溶液。以保留时间定性，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。12种组分的色谱分离图见图1，其中各组分