气相色谱法测定糕点中富马酸二甲酯.docVIP

气相色谱法测定糕点中富马酸二甲酯 　　摘要：采用毛细管气相色谱法测定糕点中的富马酸二甲酯。本实验采用氯仿作为提取液提取糕点中的富马酸二甲酯，提取液注入气相色谱仪经毛细管色谱柱分离用FID检测器进行检测。本法的方法检出限和定量限分别是2.5mg/kg和7. 5mg/kg，线性范围是50-300μg/mL，r=0.999840，回收率在93.6-102.6%。本法可以很好分离脂肪和富马酸二甲酯，方法操作简单方便，灵敏度高，结果满意。 　　关键词：糕点 富马酸二甲酯 气相色谱 　　中图分类号：0657.3 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2013）24-0000-00 　　富马酸二甲酯（DMF）属二元不饱和脂肪酸酯类，因其蒸汽压较高，它可抑杀常见的黄曲霉、黑曲霉、青霉、交链孢霉、串珠镰刀霉、白地霉、土曲霉和杂曲霉等霉菌。20世纪80年代开始，富马酸二甲酯曾经作为国内外使用的效果好、用量少、使用成本低、应用范围广的无毒的防腐、防霉、防虫及保鲜剂，广泛应用于食品、饲料、皮革、粮食、纺织品、化妆品的防腐、防霉、防虫及公共场所和家庭中的空气抑杀菌净化作用。 　　然而，在使用过程中发现富马酸二甲酯会对人体产生一些伤害，因为 DMF可以通过皮肤接触、呼吸系统和消化系统进入人体，对人体健康造成危害。DMF的皮肤接触能够引起难于治疗的接触性皮炎，而通过消化道和呼吸道进入体内的DMF水解以后，产生一定含量的甲醇，从而引起毒害。2009年3月17日，欧盟委员会通过了关于投放到欧洲市场上的商品中禁止含有富马酸二甲酯的2009 /251 /EC的指令[1]。该指令要求进入欧盟市场的商品中富马酸二甲酯的最高含量不得超过0.1mg/kg。针对这种情况，我国现已禁止使用。但是，近来仍发现一些不妨商贩在继续使用。 　　通过查阅相关文献[2][3][4][5]，根据实验室现有条件，得到以下关于糕点中富马酸二甲酯的气相色谱检测方法。本方法利用脂肪易溶于氯仿但是不容易透过0.45μm滤膜而DMF可以顺利通过过0.45μm滤膜这一性质[6]，用于提取糕点中的DMF，再用过0.45μm滤膜去除样品中的脂肪和蛋白质等大分子物质，然后将提取液注入气相色谱仪经毛细管色谱柱分离，FID检测器检测，检测结果比较令人满意。 　　1 实验部分 　　1.1仪器与试剂 　　气相色谱仪（附带离子火焰检测器）（6890N，美国Agilent） 　　振荡器（HZQ-X300，上海一恒） 　　PB303-E电子天平：感量0.1mg 　　富马酸二甲酯标准品（纯度：99.0%，德国） 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 色谱条件 　　色谱柱：Agilent HP-5（30m*0.32mm*0.25?m）；进样口温度：160℃；检测器温度：200℃；柱温：40℃（1min），先以20℃/min升至80℃（1min），再以20℃/min升至155℃（3min）；载气：高纯氮；尾吹流速50mL/min；氢气流速35 mL/min；空气流速：500 mL/min；进样量：1?L。 　　1.2.2 标准曲线的制备 　　准确称取0.100g富马酸二甲酯（含量99.0%，德国），用少量氯仿溶解，转移至100mL容量瓶中，用氯仿稀释至刻度，得 1.0mg/mL的储备液。再分别吸取该标准储备液制成浓度分别为50、100、150、200、250、300 μg/mL 的富马酸二甲酯标准系列。 　　1.2.3 样品制备 　　称取10g左右粉碎样品，置于250mL具塞三角瓶中，加入30mL氯仿，在振荡器上振摇30min，用定性滤纸过滤，滤液在40℃挥发至5-6mL左右，过0.45μm滤膜，最后定容至10mL，备用。 　　1.2.4测定 　　取标准系列和样品溶液各1.0μL，按上述色谱条件分析，以外标峰高法计算糕点中富马酸二甲酯的含量。 　　1.2.5计算公式 　　2 结果与讨论 　　2.1 色谱条件的选择 　　通过实验，我们发现选用Agilent HP-5柱时，富马酸二甲酯分离效果很好，峰形尖锐，无拖尾现象，标准品图谱见图1，同时对柱温条件和升温程序进行了筛选，最终确定了初始柱温40℃（保持1min），先以20℃/min升至80℃（保持1min），再以20℃/min升至155℃（保持3min）的条件下，出峰时间是8.911min，与其他人研究相比[2][7]，可以获得较好的峰形，延长出峰时间目的也是为了让一些低沸点的萃取物先出来，减少对DMF的干扰。同时，每次选用260℃高温吹出柱内残留杂质，用以防止氯仿共萃取的高沸点物质污染色谱系统。实验表明，高沸点的脂肪没有对实验结果造成干扰。 　　2.2 样品前处理 　　富马酸二甲酯易溶于乙醇，丙酮，氯仿和乙酸乙酯等有机溶剂中，所以我们选用三氯甲烷、乙酸乙酯、和无水乙醇三