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简析中段尿在常温下保存时间对培养结果影响
简析中段尿在常温下保存时间对培养结果影响
【摘要】目的:研究临床中段尿液标本在常温下不同的保温时间对细菌培养结果的影响,以明确尿液标本最合理保存时间,加强对标本细菌培养前的保存时间控制,以为临床诊断提供可靠的依据。方法:随机选取114例中段尿液标本,比较其在新鲜尿液即刻培养结果和在室温(22-25 ℃)的环境中分别放置0.5,1.0,2.0,3.0,4.0和5.0h等不同时间点细菌培养结果的分离率差异,采用样本率与总体率(新鲜尿液培养的分离率)的差别检验([u]和P),分析其差异是否具有统训一学意义。结果:新鲜的尿液标本培养无菌生长67份,占58.8%;杂菌生长3份,占2.6%;培养出病原体44株,分离率为38.6%,其中革兰阴性杆菌20株,革兰阳性球菌16株,真菌8株;新鲜尿液即刻培养与放置0.5 h培养结果分离率差异无统计学意义(38.6 % );之后随放置时间延长分离率逐渐升高,2.0h接种标本分离率为43 %,与新???尿液即刻培养分利率差异无统计意义([u]=0.9489,Pgt;0.05);随后放置3.0,4.0和5.0h后接种标本分离率分别为50.9% ,55.3%和63.2%呈显著增高([u]值分别为2.627、3.586和5.446,P值均小于0.01)。结论:尿培养标本在常温下不同的保存时间对培养结果有着重要影响,尤其在2h后影响更为显著。准确有价值的培养结果,与标本合理的存放时间有极大的关系,加强尿液培养前阶段的保存时间控制非常重要。
【关键词】中段尿;常温;保存时间;细菌培养结果
尿培养是临床常规检验项目之一,对疾病诊断、疗效监测等具有重要指导价值,其意义在于监测泌尿系统是否健康,正常尿液是无菌的,但当清洁中段尿菌数超过100000个/ml,即可诊断为尿路感染。其中尿液培养质量管理涉及多个环节,每一个环节出现问题都会给检验结果造成误差,而在这些环节中,往往被检验工作者所疏忽的是尿液样本的放置时间。因此正确的收集、运送、保存标本,全而的质量控制是整个培养工作质量保证的前提,加强对影响尿液培养结果的因素分析至关重要。因此,本研究对中段尿在常温下不同的保存时间,对培养结果所造成影响的具体差异进行了研究,现报道如下。
1资料与方法
1.1仪器与材料
统一规格的一次性无菌留样杯(温州市倍可特医疗器械有限公司);培养箱;血琼脂平板、沙保弱培养平板、一次性5uL定量接种环、全自动细菌鉴定分析仪及配套的革兰阴性及革兰阳性细菌鉴定板条(均为BD公司产品)。
1.2尿液标本采集
嘱咐研究对象留晨起首次尿的中段尿,晨尿反映基础代谢状态,尿量及各种成份
比较稳定,其PH值可保持有形成份的完整。方法:留取早晨清洁中段尿标本,研究对象睡前少饮水,清晨起床后用肥皂水清洗会阴部,女性应用手分开大阴唇,男性应翻上包皮,仔细清洗,再用清水冲洗尿道口周围;开始排尿,将前段尿排去,中段尿约4-6mL直接排入专用的无菌容器中,立即加塞送检。共采集114份中段尿样本。
1.3接种与培养
在生物安全柜中,进行无菌操作使用一次性定量接种环取新鲜中段尿液标本,一环接种于血平板,一环接种于沙保弱平板,然后将接种好的血平板与沙保弱平板在5 min内放入35℃培养箱培养18-24 h。然后在生物安全柜中无菌操作保存剩余已接种的标本(室温22-25℃),分别存放0.5,1.0,2.0,3.0,4.0和5.0h,按上述操作再次接种并培养。
1.4观察与鉴定
在培养结束后观察各个平板的菌落形态,菌落计数,对病原菌检测阳性的平板,进一步对细菌进行鉴定,具体操作按全自动细菌鉴定分析仪操作规程进行。
1.5统计学处理
比较新鲜尿液培养结果与存放0.5,1.0,2.0,3.0,4.0和5.0h后标本培养的分离率,使用样本率与总体率(新鲜尿培养的分离率)的差别检验。[u]lt;1.96,Pgt;0.05表示差异无统计学意义;[u]≥1.96,Plt;0.05表示差异有统计学意义;[u]≥2.58,Plt;0.01表示差异有高度统计学意义。并且统计中段尿常温下不同保存时间培养菌落数变化情况。
2结果
2.1新鲜中段尿培养结果
114份新鲜的尿液标本培养无菌生长67份,占58.8%;杂菌生长3份,占2.6%;培养出病原体44株,分离率为38.6%,其中革兰阴性杆菌20株,占45.4%,包括大肠埃希菌10株(22.8%),肺炎克雷伯菌2株(4.5%),奇异变形杆菌2株(4.5%),阴沟肠杆菌2株(4.5%),鲍曼不动杆菌2株(4.5%),粘金黄杆菌1株(2.3%),产气肠杆菌1株(2.3%);革兰阳性球菌16株,占36.5%。包括粪肠球菌5株(11.4%),
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