转基因动物复习总结.docxVIP

第一章：概述1.转基因动物技术是指借助基因工程技术将体外重组的(结构)基因导入受精卵或早期胚胎，培育出转移基因个体的技术。2.转基因动物（Transgenic animal）是指在动物基因组内稳定地整合以实验方法导入的外源基因，并且外源基因可以稳定地遗传给后代的遗传工程动物。3.外源目的基因的制备 外源目的基因有效的导入生殖细胞或胚胎干细胞 选择获得携有目的基因的细胞，选择合适的体外 培养系统和宿主动物 转基因细胞胚胎发育及鉴定 筛选所得的转基因动物品系4.制备转基因动物的主要方法有： 基因显微注射法 胚胎干细胞移植法 逆病毒感染法 精子载体导入法 基因敲除和敲入技术 人工酵母染色体法等 5. 受精卵的显微注射技术 优点:①转移效率稳定 ;②转移基因长度可长达l00kb; ③转移不含载体片段的DNA,避免原核载体片段的表达抑制作用;④不经嵌合体途径获得纯系;⑤实验周期短。缺点：①操作复杂，需专门技术人员，设备昂贵精密，不易推广;②导入目的基因拷贝数无法控制;③多拷贝整合位点不易克隆，常导致宿主DNA较大突变，有的可造成严重生理缺陷。6.逆病毒感染法用高滴度载体病毒感染着床前、后胚胎，通过嵌合体筛选途径获得纯系。 优点有:①单拷贝基因导入;②单一位点整合，易分析插入位点③整合常发生在病毒基因LTR片段，目的基因不会破坏;④整合受病毒基因插入宿主DNA的机制控制，不易发生大的突变;，⑤