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第2节 基因工程及其应用 学习目标: 从大肠杆菌说起 从大肠杆菌说起--胰岛素 一、基因工程的原理 基因工程的“专用工具” 基因工程的基本操作步骤: 目的基因的提取、与运载体的结合 目的基因导入受体细胞、目的基因的表达 基因工程 原理: 优点: 基因操作工具 步骤: 三、转基因生物与转基因食品的安全性 * * 下图表示某种农作物①和②分别培育出④⑤⑥三个品种的过程,请回答: 1、用①和②培育成⑤的过程所采用的常规方法Ⅰ和Ⅱ分别称________和________,其培育⑤所依据的原理是_____________. 2、用③培育④的常规方法Ⅲ是_______________.由③培育出④再培育出⑤的育种方法称为____________,其优点是_________________. 3、由③培育成⑥常用的方法Ⅳ是_________________________,其形成的⑥称为______倍体。 ① AABB ② aabb ③ AaBb ⑥AAaaBBbb ④ Ab ⑤ AAbb Ⅰ Ⅴ Ⅳ Ⅱ Ⅲ 杂交 自交 基因重组 花药离体培养 单倍体育种 缩短育种年限 秋水仙素处理萌发的种子或幼苗 四 1、基因工程的基本原理 2、举例说明基因工程在各生产领域中的运用 3、关注转基因生物和转基因食品的安全性 大肠杆菌能合成人的胰岛素吗?能合成干扰素吗? 每100kg 猪或牛的胰腺中提取 4-5g胰岛素; 1979年,将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌的DNA分子重组,并且在大肠杆菌内获得表达;2000L培养液提取100g胰岛素,相当于2吨猪胰腺中提取的量。 1982年,美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场,售价降低了30%-50%。 干扰素是病毒侵入细胞后产生的一种糖蛋白。干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染,是一种抗病毒的特效药。此外干扰素对治疗某些癌症和白血病也有一定疗效。 传统的干扰素生产方法是从人血液中的白细胞内提取,每300L血液只能提取出1mg干扰素。 1980-1982年,科学家用基因工程方法在大肠杆菌内获得了干扰素,1KG培养物中可以得到20-40mg干扰素,1987年上述干扰素大量投放市场。 从大肠杆菌说起--干扰素 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。 一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子的酶。 基因的“剪刀”——限制性内切酶 大肠杆菌(EcoRI)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 限制酶 限制酶 两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后,末端可以互相黏合,这种黏合只能使互补的碱基连接起来,而DNA骨架上的缺口,需要靠DNA连接酶“缝合” 。 基因的“针线”——DNA连接酶 这样,一个重组的DNA分子就形成了 质粒是存在于细菌细胞质中,能自主复制的很小的环状的DNA分子。 基因的运输工具——运载体 目前常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒。 1、提取目的基因 2、目的基因与运载体结合 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测和表达 DNA 质粒 提供质粒细菌 供体细胞 同种限制酶 DNA 连接酶 重组DNA(重组质粒) 重组DNA(重组质粒) 重组质粒 DNA 受体细胞 大肠杆菌 枯草杆菌 酵母菌 动植物细胞 导入 增殖 目的基因产物 基因重组 1、定向改造生物的遗传性状; 2、克服了不同物种之间远缘杂交不亲和 限制性内切酶-“剪刀” DNA连接酶-“针线” 运载体:质粒、病毒 1、提取目的基因 2、目的基因与运载体的结合 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的表达和检测 要将目的基因与运载体连接起来,在基因操作中应选用( ) A、只需DNA连接酶 B、同一种限制酶和DNA连接酶 C、只需限制酶 D、不同的限制酶和DNA连接酶 B DNA连接酶的作用是( ) A、自链与母链间形成氢键 B、粘性末端形成氢键 C、DNA末端间的缝隙连接 D、以上三项都对 C 下列各项中,说明目的基因完成了表达的是( ) A、棉珠中含有杀虫蛋白基因 B、大肠杆菌中具有胰岛素基因 C、酵母菌中产生了干扰素 D、抗病毒基因导入土豆细胞中 C 科学家将大麦中与抗旱节水有关的基因导入小麦,得到转基因小麦,这项技术的遗传学原理( ) A、基因突变
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