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精子活率、密度、畸形率
精子活率、密度、畸形率和精液PH值的测定
实验目的
通过实验,了解精子的运动方式;识别正常精子和异常精子的形态。初步学会和掌握精液密度、精子的活率、畸形率和精液酸碱度(PH)的测定方法。熟悉肉眼检查精液品质的方法。
实验材料
家畜精液、载玻片、凹灶玻片、盖玻片、球棒、医用中性石腊油、75%酒精棉球、酒精灯、伊红染液、纱布、棉花、火柴、PH比色器、PH试纸、烧杯、显微镜、保温箱。
方法步骤
一、精液的肉眼检查(一)射精量(ml)
概念: 射精量是指每次射精的体积
测定: 以连续3次以上正常采集到的精液的平均值代表
测定方法:将采得的精液倒入有刻度的试管或杯中,测其容量。
各种家畜的平均射精量为: 奶牛:5-10;肉牛:4-8; 绵羊:0.8-1.2 ;猪:150-500;山羊:0.5-1.5;马:30-100
射精量不正常的原因
现 象
原 因
过 少
采精过频、性机能衰退、睾丸炎、发育不良
过 多
副性腺发炎、假阴道漏水、尿潴留、采精操作不熟练
(二)观察精液的颜色并嗅闻气味 观察精液的色泽并嗅闻气味。 一般为乳白色或灰白色。正常牛羊精液呈乳白色或乳黄色,猪、马的精液呈淡乳白色或浅灰白色。
正常精液具有一种特有的腥臭味,该气味由前列腺产生。是由一种称为精氨的化学物质经过氧化以后散发出来的,很像栗子花的味道。精氨是前列腺分泌物所含的多种成分之一。
腥味:有脓液
臊味:有尿液或包皮液
不正常精液颜色原因分析
正常精液特征
依从浓到稀:乳黄-乳白-白色-灰白
淡红(鲜红)
生殖道下段出血或龟头出血
淡红(暗红)
副性腺或生殖道出血
绿
副性腺或尿生殖道化脓
褐
混有尿液
(三)云雾状
是指新鲜精液在33-35℃ 温度下,精子成群运动所产生的上下翻卷的现象。
云雾状的明显程度代表高浓度的精液中精子活力的高低。
云雾状分级标准
+++ 翻明显而且较快
++ 翻明显但较慢
+ 仔细看才能看到精液的移动
- 无精液移动
二、精子活率测定
精子活率:在显微镜下观察,在一个视野内向直线前进运动的精子占全部精子总数的百分率。
一般在37-38°C温度下进行评定,牛、羊精液尚需用生理盐水作稀释后才能评定。 活力一般用0-1.0的10级评分,一般新鲜采精液活率应该为0.7~0.8左右。
测定精子活率的方法很多,有活精子计算法,死活精子染色法和目测法。目测法因使用的材料和工具不同,又可分为平板压片法、悬滴检查法和油盖检查法三种。
1、平板压片法
(1)取高温消过毒的载玻片、盖玻片、玻棒若干备用。
(2)滴一滴精液(如太浓,可先用生理盐水稀释)于消毒过的载玻片上,盖上消毒过的干净盖玻片。
(3)将制好的片子放在显微镜载物台上,先用低倍镜观察,后用高倍镜(400~600倍)观察(如气温低,须将显微镜置于保温箱内升温到37℃后,再进行镜检)。
2、悬滴检查法
(1)滴一小滴精液于消毒好的盖玻片中央。
(2)在凹灶处周围涂上少量水,然后将凹处对准盖玻片上的精液,并覆盖于盖玻片上,使其贴在一起。
(3)将玻片倒转过来,使精液滴悬挂于盖玻片下,便可放在显微镜下观察。
3、油盖检查法
(1)滴一滴精液于消毒过的载玻片上。
(2)在精液上面滴一滴医用中性石腊油即可放在显微镜下观察。
4、活率的评定
(1)在显微镜下观察精子的运动方式,并区别直线前进式运动、旋转式运动和摆动式运动的精子活动的情况。
(2)根据视野中呈直线前进式运动的精子所占比例进行测定。如全部精子均呈直线前进式运动,看不到非直线前进式运动的精子,可评为“1.0”分;如果视野中只有80%的精子呈直线前进式运动,其余20% 呈非直线前进式运动,则评为“0.8”分,其余依此类推。测定时要求多看几个视野,然后进行综合评定。在一个视野中,如果呈前进式运动的精子占多数,则重点估测非前进式运动的精子所占比例,反之则估测前进式运动的精子所占比例。
三、精子密度检查
测定精液密度的方法有估测法,红细胞计数法和光电比色法。其中估测法通常结合精子活率进行检查,一般用测定活率的平板压片法进行。
取一小滴精液于清洁的载玻片上,加上盖玻片,使精液分散成均匀一薄层,但不得有气泡,也不能使精液外流或溢于盖玻片上,置显微镜下放大400~600倍观察,按下列等级评定其密度(如图2-1)。
图2-1 稀 中 密
1、稀:精子分散
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