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- 2018-07-20 发布于贵州
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MDA多重置换扩增技术研究进展ppt课件
多重置换扩增(MDA)技术对单细胞基因组测序技术研究进展;基因测序技术;截至2007年,第二代基因测序方法已经普遍推广应用,极大地降低了测序的成本和时间,实现了高通量测序。
2008年又提出了更快更好的第三代测序方法---单分子测序(SMS)
;基因测序技术;单细胞全基因组测序;全基因组扩增技术; 通过MDA扩增DNA;目前单细胞微生物可以通过对多重置换扩增反应( MDA)得到的扩增DNA进行测序。
在细菌中几个飞克 (10-15g)的DNA能扩增得到微克(10-6g)的高分子量DNA,扩增得到的DNA 适合DNA文库的构建和Sanger测序。MDA生成的DNA也可直接作为模板供焦磷酸测序。
单个细胞间基因序列的联系也是一个功能强大的工具,它可用于对从环境DNA的提取物(宏基因组序列)得到的多重有机体通过鸟枪法测序来指导构建基因芯片。
;多重置换扩增(MDA)的示意图:
????????首先随机六碱基引物在多个位点与模板DNA退火,接下来Phi 29 DNA 聚合酶在DNA的多个位点同时起始复制,它沿着DNA模板合成DNA,同时取代模板的互补链。被置换的互补链又成为新的模板来进行扩增,因此最终我们可以获得大量高分子量的DNA.;多重置换扩增 (MDA);多重置换扩增技术(MDA);;环境样品的处理;分离单细胞;细胞分选;流式细胞仪的测量对象;全基因组扩增(WGA)是一
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