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* 遗传学实验 果蝇的观察和饲养 一 实验目的 1 掌握区分雌雄果蝇的方法。 2 了解果蝇的几种常见突变体类型。 3 掌握果蝇的饲养及管理方法,同时掌握果蝇的实验处理方法和基本技术(麻醉、接种等)。 4 掌握果蝇培养基的配制技术。 二 实验原理 果蝇,英文俗名fruit fly或vinegar fly,广泛分布于全球温带及热带气候区。而且由于其主要以腐烂的水果为食,因此在人类的栖息地内如果园、菜市场等地区皆可见其踪迹。目前已发现1000个物种的果蝇,大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食,少部分则以真菌、树叶或花粉为食物。 1 普通果蝇是双翅目昆虫,它的生活史从受精卵开始,经历幼虫、蛹、成虫阶段,因此是一个完全变态过程。 2 果蝇中有许多突变体类型,这些突变体属于形态突变,容易观察,是研究遗传学的好材料。 3 果蝇生活周期的长短和温度关系很密切,一般在20~25℃之间生活较好。 5天 4天 8天 7天 18天 57天 卵→幼虫 幼虫→成虫 25 ℃ 20 ℃ 15 ℃ 10℃ 三 实验材料 1 果蝇野生型品系:红眼、灰身、长翅、直刚毛。 2 突变型果蝇:白眼、黑檀体、残翅、卷刚毛、黄体等,控制这些突变性状的基因中,w(白眼)、sn(卷刚毛)位于1号(X)染色体上,vg(残翅)位于2号染色体上,e(黑檀体)位于3号染色体上。 四 实验药品及器具 1 实验药品 葡萄糖,蔗糖,琼脂,玉米粉,酵母粉,异丁酸,乙醚。 2 实验器具 镊子,白瓷板,麻醉瓶,毛笔,指管,棉塞,高压灭菌锅,毛边纸纸插,生化培养箱,显微镜,1000ml烧杯,1000瓦电炉,石棉网,玻璃棒,移液器(移液管、吸耳球) ,标签纸、硫酸纸。 五 实验内容及步骤 ㈠ 果蝇的生活史及形态观察 1 卵 白色,长椭圆形,长约0.5mm,背面前端有两条触丝。 2 三龄幼虫 幼虫经两次蜕皮而成三龄幼虫,长约4-5mm,肉眼观察可见一端稍尖且有一黑点(口器)为头部,稍后面有一对半透明的唾腺。 3 蛹 三龄幼虫从培养基中爬出附在瓶壁上化蛹,蛹呈梭形,起初颜色淡黄、柔软,以后逐渐硬化变为深褐色,表明将要羽化了。 4 成虫 刚从蛹壳里羽化而出的成虫虫体较长,翅未展开,体表也未完全几丁质化,呈乳白色半透明状;虫体体色逐渐加深,变粗短而成椭圆形,双翅伸展。 羽化后的雌蝇一般在12h以后才有交配能力,2天后开始产卵。 ㈡ 果蝇的性状观察 1 果蝇成虫的性别鉴别 性梳是鉴别雌雄果蝇的最可靠指标。性梳(黑色鬃毛流苏)着生在雄果蝇的第一对足的跗节前端表面。 2 果蝇实验中常用的一些突变品系 翅退化,不能飞 ㈢ 果蝇的麻醉处理 在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中,应先将果蝇麻醉,使其保持安静状态。麻醉方法如下: 1 准备一只与培养瓶(指管)口径相同的麻醉瓶,并配以脱脂棉塞。 2 去掉培养瓶棉塞,立即与麻醉瓶口相对,培养瓶在上,一手稳住两瓶,另一支手轻轻震拍培养瓶,使果蝇落入麻醉瓶中。 *
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