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再分散合成AuNPs利用经典方法合成13nm左右的AuNPs活化DNA
近期工作总结 李伟 2012.11.09 工作进展 工作计划 文献分享 Hg2+检测 利用DNA聚合酶扩增信号 体现实验目的，通过循环信号扩增，最终获得明显的检测信号 单链DNA修饰AuNPs 获得修饰DNA的金纳米，是检测的关键步骤。 总体实验 验证每步实验联合的总体效果，验证信号扩增的效果。 单链DNA修饰磁性粒子 获得修饰DNA的磁性粒子，在检测构成中用于分离适配体与引物，以及模板与用于扩增信号的引物。 近期工作总结 离心、洗涤、再分散 合成AuNPs 利用经典方法合成13nm左右的AuNPs 活化DNA 利用TCEP断开二硫键 链接Au NPs 37℃ 摇床24h 逐渐升高Na+浓度 ssDNA修饰Au NPs 老化工能化的 Au NPs 解决金纳米与DNA连接问题 100μl 150μl 200μl 增加DNA量 改变老化方式 Au NPs与ssDNA连接后，离心，加入含0.1M NaCl 的缓冲溶液中老化。 “Step wise”加入高浓度的NaCl缓冲溶液。 增加Na+含量 升盐浓度至0.3M，可以获得比较好的稳定性。 其它方法 其它方法 ssDNA修饰MBs ssDNA与磁性粒子连接的问题 工作计划 整体实验 信号扩增 DNA聚合酶的使用 基础性工作 ssDNA 连接 近期 掌握Klenow Fragment的使用方法，最适反应条件。 在完成前期准备后，进行检测试验，确定标准曲线，检测上下限 一周左右 选择合适的缓冲溶液和实验条件 文献分享 THANK YOU * * * * * * * *
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