蛋白质地Wesrern印迹分析.pptVIP

蛋白质的Western印迹分析 刘二战 一、原理 二、方法 三、样品蛋白的制备 三、样品蛋白的制备 三、 样品蛋白的制备 三、样品蛋白的制备 三、 样品蛋白的制备 三、 样品蛋白的制备 三、 样品蛋白的制备 三、 样品蛋白的制备 三、 样品蛋白的制备 三、 样品蛋白的制备 四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉 四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉 四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉 四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉 四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉 四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉 四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉 四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉 四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉 五、转膜 五、转膜 五、转膜 五、转膜 五、转膜 五、转膜 六、检测 六、检测 六、检测 六、检测 请批评指证谢谢 * * 一个基因表达的最终产物是产生相应的蛋白，因此检测蛋白是测定基因表达的主要标志。 原理：Western Blotting 是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离；并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜进行杂交，使其与膜上的靶蛋白特异性结合；再与经辣根过氧化物酶标记的二抗结合，最后用ECL试剂反应，经X线片曝光