如何通过免疫指标检测反应病毒或胞外菌感染ppt课件.pptVIP

如何通过免疫指标检测病毒感染或胞外菌感染;免疫检测是目前生物学检测方法中用途最广泛的一种方法。 具有高度精确、灵敏、特异的特点。 可用于免疫学的基础理论和应用研究，也可应用于生物学研究的各个领域。 ;免疫指标;胞外菌感染的免疫反应及免疫指标变化;常见胞外菌;;2.吞噬细胞 细菌一旦突破皮肤或粘膜屏障与侵入机体组织后，吞噬细胞就发挥作用，主要是中性粒细胞。在一般情况下，细菌可被吞噬消灭，只有毒性强，数量多的细菌才能进入血液或其他器官，需由肝、脾、血液中的吞噬细胞继续吞噬。有的致病菌具有抗吞噬作用。;3.补体 通过两个机制杀菌：直接溶菌作用和调理作用。补体通过经典途径和旁路途径被激活。在血清中的溶菌作用依赖于补体膜攻击复合物的形成。膜攻击复合物沉积于细菌外膜，嵌进外膜使其失去完整性，导致细菌溶解。补体亦可介导中性粒细胞，吞噬细胞的调理吞噬作用。 ;4.抗体 虽然补体是抗胞外菌感染的重要因素，但单独补体系统不足以有效杀灭或调理吞噬病原菌。许多重要胞外菌的清除，主要靠体液免疫系统特异性抗体的作用及补体感染菌的清除，也可由抗体的协同作用而得到加强。 IgA尤其是sIgA可干扰细菌的黏附。抗体的Fab段与抗原结合，Fc段与细胞的受体结合，通过搭桥而促进吞噬作用。抗体与毒素结合，可掩盖毒素的活性部分，毒素与抗毒素形成的复合物可迅速被吞噬细胞清除。;临床上最为常用的是病原体抗原检测和宿主血清抗体检测。;病原体抗原检测;常用血清学检测方法： ; ;细菌分离培养与鉴定的一般程序;纸片法：只可定性 试管法：可定量（测MBC、MIC） E-test： 可定量（只可测MIC）;（三）病原菌抗原的检测 EIA, IF, Western blotting （四）检测病原菌核酸 核酸杂交 PCR 基因芯片（gene chips）;致病菌的检验程序:;病毒感染的免疫反应及免疫指标变化;病毒的致病机制 直接：杀细胞性病毒感染宿主细胞后，可引起细胞生物大分子代谢紊乱，导致细胞膜结构及细胞骨架的改变，而致细胞死亡，称之为细胞病变。（cytopathic effect） 间接：非杀细胞型病毒感染宿主细胞后，尽管不直接杀伤和破坏???主细胞，通常宿主细胞仍可保持增殖分化。但这类病毒常可长期持续性存在于宿主细胞内。更为严重的是，这种病毒可改变机体的免疫应答反应，通过免疫抑制及免疫损害作用，造成免疫病理改变，导致疾病发生。;抗病毒免疫机制;2.补体 补体可以增加中和抗体活性，调理吞噬，溶解病毒感染细胞。有的补体可以直接溶解病毒。某些病毒与补体结合后能上调体液免疫应答。;3.干扰素 干扰素的抗病毒活性，主要通过IFN诱生的有宿主细胞编码的抗病毒蛋白来实现。IFN与受体结合后，启动酪氨酸激酶，磷酸化3种不同蛋白，并形成DNA结合转录因子，与IFN可诱导基因的调控区14bp结合，启动各种抗病毒蛋白的合成。;4.CTL 病毒特异性CTL在清除细胞内感染病毒中起关键作用。虽然详尽的机制至今尚未完全明了，但CTL杀伤时有能量的消耗，且需要镁离子的参与，被认为是主动过程。;病毒感染的检查方法;一、标本采集与送检;病毒材料采集与检验结果的关系;病毒分离是诊断病毒感染的金标准，一旦阳性，即可确诊。 不适用于快速诊断，操作复杂，实验成本高，阳性检出率低等 有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。;（一）病毒分离;（二）病毒鉴定;红细胞吸附;（2）血凝作用;（3）病毒成分的直接检测;三、 电子显微镜检查;四、 血清学试验;五、 感染组织的组织学检查;狂犬病毒包涵体（Negri body）;谢谢观赏