湖南省安仁一中生物选修三《12_基因工程的基本操作程序》ppt课件.pptVIP

现代生物科技专题;目的基因的获取;基因工程的目的基因－－ 　　主要是指编码蛋白质的结构基因。;2、从基因文库中获取;;cDNA( 互补DNA)： 是由生物的某一特定器官或特定发育时期细胞内的mRNA经体外反转录后形成的互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做这种生物的cDNA文库 ;;依据：目的基因的有关信息。 如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性;2、利用PCR技术扩增目的基因;5/;5/;过程：;① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ;3、人工合成;1）反转录法：;蛋白质;; 科学家在培育抗虫棉时，经历了多次失败，才获得成功。 起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。 然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，结果成长的植株，有了抗虫能力。 ;基因表达载体的构建;基因表达载体的构建;细胞的基因结构;细胞的基因结构;成熟mRNA;基因表达载体的组成：;质粒;;将目的基因导入受体细胞;将目的基因导入受体细胞;农杆菌转化法;适用于 单子叶植物;胚珠;花粉管通道法; 将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： ; 将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法： ; 1、基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是( ) A．结构简单，操作方便 B．繁殖速度快 C．遗传物质含量少、简单 D．性状稳定,变异少;目的基因的表达和检测;DNA分子杂交;A-;目的基因;　　具体做法是：　　第一步，将目的基因在大肠杆菌中表达出蛋白质；　　第二步，将表达出的蛋白质注射动物进行免疫，产生相应的抗体，并提取出抗体（一抗）；　　第三步，从转基因生物中提取蛋白质，走凝胶电泳；　　第四步，将凝胶中???蛋白转移到硝酸纤维素膜上；　　第五步，将抗体（一抗）与硝酸纤维素膜上的蛋白杂交，这时抗体（一抗）与目的基因表达的蛋白（抗原）会特异结合。　　由于这种抗原—抗体的结合显示不出条带，所以加入一种称为二抗的抗体，它可以与一抗结合，二抗抗体上带有特殊的标记。如果目的基因表达出了蛋白质，则结果为阳性。;个体生物学水平;归纳: 基因工程的基本操作程序