艾滋病梅毒丙肝检测及解释.pptVIP

HIV、TP、HCV的检验及意义 HIV实验室检测 ?检测样本 HIV抗体 酶免--血清/血浆，尿液 快速检测--血清/血浆/全血，唾液 CD4：抗凝全血 病载、基因型、耐药：血浆 样本保存 抗体检测：短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃， 一周以上应存放于-20℃以下。 筛查阴性样品，建议至少保存1～2个月； 筛查阳性样品，无论确证结果如何，均应将剩余的样品保存至少10年 核酸检测：血浆4天内进行检测的可存放于4℃，3个月以内应存放于-20℃以下，3个月以上应置于-70℃以下。 CD4：室温（18～25℃）保存和运输。要求48小时内染色，染色后6小时内分析；如采血后24小时内染色，可在染色后24小时内分析。 HIV抗体检测 筛查试验 酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验 快速检测（RT） 确证试验 免疫印迹试验（WB） 条带免疫试验 放射免疫沉淀试验（RIPA） 免疫荧光试验（IFA） 初筛和复检流程 确证流程 ?质量控制 试剂盒内部对照 ：按照试剂盒要求设置 使用室内质控品：外购、阳性对照/样本稀释 ELISA检测 20次内—即刻法质控 20次后， Levey-Jennings质控图 更换试剂厂家必须重新制作质控图， 同种试剂不同批号可继续使用（注明批号） 发现失控、位移及时查找原因，必要时重新开始质控 快速检测 更换批号进行质量验证 注意反应时间、温度、数量控制 设备检定、维护 强检设备 酶标仪、移液器、高压锅、温度计（可自行比对） 自行维护 生物安全柜、洗板机、洗眼器、水平（梅毒）旋转仪 温度控制 冰箱、温箱/水浴箱内放置经检定（比对）的温度计 高压灭菌放置指示卡 洗眼器定期进行维护 SOP文件 （1）样品的接收、登记、处理、保存和运输； （2）检测方法和步骤； （3）试剂使用和保存； （4）仪器的使用维护和校准； （5）质量控制要求及程序； （6）结果解释与报告； （7）保密程序； （8）实验室数据、相关文件记录与保存； （9）不确定样品追踪和处理； （10）实验室安全防护及实验室的清理和消毒。 实验室记录 检测登记表 试验原始记录（ ELISA、快速、RPR/TURST ） 报告单/化验单 复检化验单—筛查阳性填写，信息收集完整 仪器使用、维护保养记录 质控资料 消毒记录 废弃物处理登记 冰箱温度记录 人员健康档案（体检、疫苗接种记录，化验单、体检报告） 实验室生物安全 实验室：Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2） 建立安全制度：S-SOP、意外事故处理预案、信息安全及保密制度 培训和管理：全员培训、标准防护原则 个人防护：防护用品与设施、健康监护 安全操作：样品采集与管理、仪器设备使用、利器使用 消费与污物处理 梅毒实验室检测技术 HCV的检测及意义 丙型病毒性肝炎为法定传染性疾病。 假阴性和假阳性是困惑抗HCV检测的主要问题 间接法自身的缺陷可能出现假阳性和IgM的漏检。采用第2代(Abbott)和第3代(Ortho)EIA试剂，假阳性率可达30% 抗原位点的选择以及抗原的纯化是影响检测灵敏度和特异性的重要因素； SLE, RA，某些感染性疾病等引起高浓度的免疫球蛋白造成假阳性（RF的干扰；高浓度非特异性IgG可吸附到固相载体上或包被的抗原上） SOD超氧化歧化酶干扰 厂家之间的灵敏度和特异性存在着一定差异，从而导致抗-HCV检测结果不一致； 同一厂家的不同批试剂间亦会有较大差异。 采用间接ELISA法检测抗体是评估HCV感染的初筛手段 HCV特异性抗体阳性反映了患者体内病毒存在，一旦抗HCV阳性，终生难以转阴。 HCV抗体检测的双抗原夹心ELISA法 HCV抗原检测方法的建立 HCV的RNA和抗原在患者体内呈间歇阳性； 病毒基因型复杂易变异，基因水平的检测质量不够稳定； 重组免疫印迹实验（RIBA）被认为是HCV监测的金标准。 几个月前报告“阳性”，目前报告“阴性”？ 临界值标本、弱阳性标本，如何处理？ 产妇发现抗-HCV阳性，可以哺乳吗？ ? 无输血及血制品史 ? 偶尔在外治疗牙病 三家医院结果为什么不一致？ A院“S/CO3.5”，B院“弱阳”，C院“阴性” 老人内镜术后检查抗-HCV阳性，惹上麻烦？ 遇见这样的事情，您不困惑？ 二、丙型肝炎病毒实验室检测中的策略 《丙型肝炎病毒实验室检测技术规范》2011年9月20日颁布实施 起草单位： 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心 使用范围： 全国所有的丙型肝炎病毒检测实验室 解释权： 中国疾病预防控制中