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临床微生物标本的质量控制 目录 一 意义 二 生物安全 三 标本类型分类 四 采集运送原则 五-十四 标本类型各论 一 意义 分析前质量控制对检验结果的重要性 规范、指导微生物标本的采集、转运,保证微生物标本分析前质量,提高临床符合率。 标本的正确采集转运是整个检测过程中至关重要的第一环节。 二 生物安全 任何标本中都可能存在潜在的致病性微生物。 标本采集首先必须考虑生物安全,必须保护工作人员和其他人员免于暴露病原体。 从执行标本采集开始所有步骤都必须采取防护措施。(特别注意TB等高传染性病原体) 所有标本容器都必须是防漏、防水、密闭的。 不得使用带针头的容器送检,以防扎伤。 三 标本类型分类 四 采集及运送原则 怀疑感染存在时进行细菌培养标本的采集。 尽量选择在抗菌药物应用之前,对已用药物的患者,因病情不允许停药,应在下一次用药前采集 。 采集有临床意义的标本(如病灶内脓性分泌物),正确的解剖学位置,合适的时间。 选用无菌、密闭、防水容器,严格执行无菌操作手续,防止污染。 有正常菌群寄生的部位应尽量避免污染。 标本容器进行正确标识:病人姓名、性别、床号、住院号、唯一性条形码等。 可能分离到对温度敏感致病菌的标本需要保温立即送检。 五、血液与骨髓 关键点: 采血指征 消毒灭菌 采血时间 采血次数 接种血量 导管相关血流感染CRBSI 五、血液与骨髓 采集指征 当怀疑血流感染或骨髓感染时,应常规行血培养 怀疑患者有血流感染的症状有: 不明原因的发烧(>37℃)或体温过低(<36℃) 白细胞增多( >10,000/ul),粒细胞减少( <1,000ul) 休克,寒颤,呼吸频率加快 心率异常加快 严重的局部感染(脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾炎,腹部术后感染) 昏迷 多器官衰竭 低血压或高血压 采血流程操作图 皮肤消毒程序 采血时间: 应于发热或寒战高峰到来之前采血,已经应用抗菌药物进行治疗,应在 下一次药物前采血。对于已用抗生素的患者,应使用能中和吸附抗生素的培养瓶。 采集次数 CLSI建议常规的血培养每次采集2-3套标本,每套应包括一个需氧培养瓶,一个厌氧培养瓶 一个静脉穿刺点只能采集1套血培养,采集第2套血培养应该选择第2个静脉穿刺点 即寒战—升温之间采血20ml,分装两个瓶内,各分配10ml,当采血量不足20ml,应先注入需氧瓶这样首先满足需氧瓶的采血量可以更好地分离出真菌、绿脓杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌 送检血培养次数的重要性----表皮葡萄球菌的临床检测 标本采集间隔时间 同时或短时间内采集2-3套血培养,因为体内巨噬细胞吞噬系统会在15~30min内清除掉进入人体内的细菌。 可疑急性心内膜炎患者要立即取血作血培养,30分钟内完成3套血培养的采集,采集后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报告阴性,则继续采集2套血培养。 可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1h采集1套,连续采集3套标本。如果24小时内报告阴性,则继续采集2套血培养。 采血量 厌氧瓶送检的意义 根据文献,厌氧瓶除了检出厌氧菌外,对肠杆菌,葡萄球菌和苛养菌的检出有优势。 资料显示1, 16%的链球菌和17%肠杆科细菌仅厌氧瓶报阳。 Khanna2对7072份同时做需氧瓶和厌氧瓶的血培养结果分析显示: 640份血培养阳性,阳性率为9% 需氧和厌氧瓶同时阳性为55% 仅需氧瓶阳性为26% 仅厌氧瓶阳性为19% 1.Bartlett JG, Dick J. The controversy regarding routine anaerobic blood cultures. Am J Med , 2000, 108: 5052506. 2. Khanna P, Collignon P. Anaerobic bottles are still important in blood culture sets. Eur J ClinMicrobiol InfectDis, 2001, 20: 2172219. 成人及儿童患者分离菌株在需氧和厌氧培养瓶的生长情况对比 儿童专用培养瓶: 儿童厌氧菌感染极少 ,建议只采用儿童瓶 厌氧培养只考虑针对特殊的高危儿童 专门为儿童设计,采血量为1-3 ml 添加特殊促进细菌生长因子,采用树脂专利技术 低SPS浓度可提高儿童特征性病原菌(如耐瑟氏菌) 的检出率 儿童血培养采血量 儿童的采血量不能超过其总血容量的1%, 可按年龄或体重分别采足够的血量 树脂颗粒吸附抗生素 BACTEC树脂瓶 最大程度吸附抗菌素,提高阳性检出率 吸附营养物质在树脂表面,促进微生物的生长 撞破红细胞使其内营养物质释放出来供微生物利用 撞破白细胞
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