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(2015四川卷9)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中,可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如下图所示(注:农杆菌中Ti质拉上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中)。
(1)过程①需用同种_________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来,应使用___培养基。
;(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让____进入棉花细胞;除尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是_______________。
(3)若过程④仅获得大量的根,则应在培养基中增加
_______以获得芽;部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,原因是___________________。
(4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是______。种植转基因抗虫棉能减少___的使用,以???轻环境污染。
;(2015重庆6)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是( )
A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得
B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点
C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来
D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用;(2014广东25)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图14所示,下列叙述正确的是 ( );;(2014重庆4)题4图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是( )
A.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与
B.③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上
C.④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状
D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异;(2014江苏23)下列关于基因工程技术的叙述,错误的是 ( )
A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达;(2014天津) 8.(12分)嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:
Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶
(1)PCR扩增bglB基因时,选用 基因组DNA作模板。
(2)右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。
(3)大肠杆菌不能降解纤维素,
但转入上述建构好的表达载体后
则获得了降解纤维素的能力,这
是因为 。;Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响;Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获取热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中 (多选)。
A.仅针对bglB基因进行诱变 B.bglB基因产生了定向突变
C.bglB基因可快速累积突变 D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变;(九)回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。(9分)
pIJ702是一种常用质粒(图20),其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因;mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。
67.质粒DNA分子中的两条链靠____键维系成双链结构。;(九)回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。(9分)
pIJ702是一种常用质粒(图20),其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因;mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。
68.以SacⅠ和SphⅠ切取
的目的基因置换pIJ702上
0.4kb(1kb=1000对碱基)
的SacⅠ/SphⅠ片段, 构
成重组质粒pZHZ8。 上述
两种质粒的限制酶酶切片
段长度列在表4中。由此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点,并
说明判断依据____________________________________
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