核酸构型与琼脂糖凝胶电泳分离的关系.PPTVIP

使用EB染色注意事项 （1）EB被认为是一种强致癌物质 （2）EB可用来检测单链或双链核酸 4.2 Gold view Gold view是一种新型极敏感染料的商品名称。其与DNA结合的亲和力高，并且结合后，能够极大增强荧光信号。 且现在的结果表明，Gold view没有明显的毒副作用。 5 所用的电压 低电压时DNA片段迁移率与所用的电压成正比。 6 电泳缓冲液 常用的有TAE、TPE及TBE TAE、TPE及TBE电泳缓冲液比较 都是常用电泳缓冲液。三者相比： 1）TAE的缓冲容量最低，如长时间电泳会被消耗，此时凝胶的阳极一侧将发生酸性化； 2）TBE和TPE比TAE花费稍贵，但有高得多的缓冲容量； 3）双链线状DNA片段在TAE中比在TBE或TPE中迁移快10%； 4）对于高分子质量的DNA，TAE的分辨率略高于TBE或TPE，对于低分子质量的DNA，TAE要差些。超螺旋DNA在TAE中的电泳分辨率要好于TBE。 二 凝胶电泳具体实验操作 包括拿到产物之后的处理到配胶、点样、跑胶、切胶到胶回收等操作步骤。 冷冻、离心。 拿到产物之后，应先置于4℃冰箱冷冻，因为产物温度高会影响跑胶的效率以及很可能造成产物的气溶胶污染，待温度降下来后，瞬时离心。 配胶。 琼脂糖凝