荧光定量PCR技术在临床医学中的应用(简)532.pptVIP

* 一人世间枯燥　　 CT 沙眼衣原体感染与致病 1. 严格的细胞内寄生。 2. 不仅可致眼部感染、肺部感染、也是STD的主要 病原体。 3. 近年来在欧美等国，沙眼衣原体的感染率和危害 性已超过淋球菌而居STD之首。 4. 在我国，在非淋球菌性尿道炎中，居首位。 5. 泌尿生殖道感染，妨碍妊娠。 6. 盆腔感染，可致生殖能力损害。 * UU 解脲脲原体感染与致病 合成尿素酶，分解尿素 2. 在非淋球菌性尿道炎其感染率仅次于衣原 体感染，居第二位。 3. 流产超过4次以上者，检出率高达80%。 4. 有30-40%男性尿道炎是由感染UU所致。 5. 与男性不育相关。男性不育患者精液中，脲原体检出率高达66.6％。检出率随精子数减少和精子活动力下降而升高。 * 1. 非培养或形态学检查的诊断技术，快速、特异、敏感。 2. 对无症状或症状轻者，可以早期确诊。 3. 对NGH、CT、UU 等混合感染者，诊断和鉴别诊断。 4. 指导用药、考核疗效。 荧光定量PCR诊断NGH/CT/UU的意义 NGH/CT/UU * NGH/CT/UU 荧光定量PCR诊断NGH/CT/UU的意义 5. 不孕不育、优生优育。 6. 流行病学调查，为性传播疾病的监控提供依据。 7. CT、UU是FDA批准的PCR检测试剂盒，可作为首选 方法，在临床推广应用。 * 人乳头瘤病毒感染与致病 1. HPV具有宿主和组织特异性，只能感染人的皮肤和黏膜上皮细胞，人是HPV的惟一宿主。 2. 有100多个型。 3. 低危型：HPV 6、11引起良性病变 (尖锐湿疣、喉乳头瘤等) HPV * 人乳头瘤病毒感染与致病 HPV 4. 高危型：HPV 16、18引起恶性肿瘤 (宫颈癌、 肛门癌、口腔癌等) 5. 免疫原性低，易形成持续性感染。 6. 新生儿产道感染。 * HPV * 1. 对典型病例可以明确诊断。 2. 对临床表现和组织病理改变都不典型的病例同样可以做出诊断。 3. 对亚临床和隐性HPV感染做出诊断。 4. 基因分型。 5. 考核疗效与预后。 6. 病毒载量与患癌症风险。 HPV 荧光定量PCR检测HPV的意义 * HPV * 三　结核杆菌与呼吸道病原体检测 TB：Tubercle bacilli CP：Chlamydia pneumonia MP：Mycoplasmal pneumonia SARS：severe acute respiratory syndrome * 结核杆菌流行现状（1） 罗伯特·科赫（１８４３——１９１０），德国细菌学家，结核杆菌发现者 结核病是一个全球性的问题，近年来在世界范围内出现流行，且呈增长的趋势 TB * 结核杆菌流行现状（2） 我国结核病的疫情仅次于印度而居世界第二位 2000年，全国人口结核感染率为44.5%，其中15～44岁人群占了53％ ，每年约有25万人死于结核病 * 结核杆菌引起的感染 肺部感染：原发性肺结核，开放性肺结核。 肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖结核、肠结核、结核性腹膜炎、全身性结核。 * 常规结核病实验室诊断方法及不足 1. 痰涂片作抗酸染色：阳性率低 、费时 2. 细胞培养“金标准”：周期太长(3-4W) 3. 血清学诊断： a. 接种BCG可出现阳性 b. 不能区分活动性结核病和治愈后留下损伤灶的病人 c. 交叉反应，假阳性 不能早期诊断！容易漏诊、误诊！ TB * 荧光定量PCR检测TB-DNA的意义 1. 能稳定检测10copy的TB-DNA ，灵敏度高 ，特异性强 2. 早期、快速、准确地诊断结核病。 痰液、肺及支气管灌洗液——肺结核 血液——播散性结核和各脏器的结核病 　 脑脊液——中枢神经系统结核病 宫颈拭子、尿道拭子——泌尿生殖道结核病 TB * 3. 荧光定量PCR检出结核杆菌阳性率显著高于痰涂片抗酸染色和改良罗氏培养法。 4. TB-DNA浓度可用于判断疗效： 痰标本中结核杆菌的数量呈逐渐下降趋势 ，TB-DNA拷贝数下降。根据病原体DNA浓度，对药物治疗及疗效观察提供参考依据 TB 荧光定量PCR检测TB-DNA的意义 * CP、MP感染可致咽炎、支气管炎和肺炎，潜伏期约2-3周，通常起病较缓慢。持续性咳嗽。 肺炎衣原体(CP)、肺炎支原体(MP)感染与致病 CP/MP MP肺炎约占非细菌性肺炎的1/3以上，或各种原因 引起的肺炎的l0％。 MP感染与小儿支气管哮喘密切相关。