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【解析】 微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度,因为不同的微生物在土壤中的含量不同;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中的唯一氮源。 【答案】 A 【例8】 自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。 实验步骤:(1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。 (2)为了得到更加准确的结果,你选用________法接种样品。 (3)适宜温度下培养。 结果分析:(1)测定大肠杆菌数量时,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确可信的是________,其理由是_____________________________。 A.一个平板,统计的菌落数是230 B.两个平板,统计的菌落数是220和260,取平均值240 C.三个平板,统计的菌落数分别是210、50和520,取平均值260 D.四个平板,统计的菌落数分别是210、300、240和250,取平均值250 (2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每毫升样品中的菌落数是________(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)。 (3)用这种方法测定的大肠杆菌比实际活菌数量________,因为_____________________________。 【解析】 实验步骤:为了得到更加准确的结果,应用稀释涂布平板法接种样品。结果分析:(1)选取多个菌落数相差不大的平板计数,取其平均值。 (2)234÷0.1×105=2.34×108。 (3)因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成,所以实际活菌数量要比测得的数量多。 【答案】 实验步骤:(2)稀释涂布平板 结果分析:(1)D 在设计实验时,一定要涂布至少三个平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性;在分析实验结果时,要考虑所设置的重复组的结果是否合理 (2)2.34×108 (3)少 当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落 课堂练习 1.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是 ( ) A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24-48小时 D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 解析 本题以“土壤中细菌的计数”为命题点,考查基础知识的识记情况。为减少空气中微生物的污染,应将平板倒置。从基本操作方法和原理入手解答该题。在细菌计数时,为保证实验结果的准确性,应至少涂布三个平板,选择菌落数在30-300的平板进行计数;然后求出平均数,再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数。 答案 D 2.利用农作物秸秆为原料可生产乙醇,生产过程中可采用微生物将秸秆水解或用酶水解,其主要技术流程如下图所示,下列相关说法错误的是 ( ) ① ② ③ ④ 秸秆碎屑→反应罐水解→压滤出渣→酒精发酵→真空分馏 A.可用刚果红染色法筛选过程①所需的纤维素分解菌 B.过程①加入的纤维素酶是葡萄糖苷酶 C.酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵 D.酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌 解析 筛选纤维素分解菌可采用刚果红染色法;纤维素酶为复合酶,至少包含三种组分,C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶;酒精发酵需在无氧条件下进行;酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌。 答案 B 3.(2012·北京)高中生物学实验中,在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是 ( ) A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上 C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上 解析 将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中进行酿酒时,在缺氧、酸性环境下其他杂菌不能生长,故不严格灭菌对其影响不大;腐乳制作中将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上,毛霉生长繁殖快且抗杂菌能力强,故不严格灭菌对实验结果影响不大;进行植物组织培养时,植物材料体积小、抗性差,而微生物繁殖快、生长迅速、会争夺培养基中的营 养,产生的代谢废物还会毒害培养材料,故培养材料一旦被微生物(如细菌)污染,将严重影响实验结果;选择培养基中已经加入了某种化学物质,以抑制不需要的微生物
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