高中生物选修1“生物技术实践”教教法简介2.pptVIP

序号 仪器名称 备注 1 分析用电子天平 万分之一电子天平1台（微量元素及植物激素类试剂称量配制） ，千分之一电子天平1台（大量元素称量） 2 微量移液器 用于培养体系调试时配制激素梯度 3 酸度计 配制培养基时调整pH值 4 磁力搅拌器 充分混匀培养基中各成分，使培养基均一 植物组织培养实验室所需设备（附） 化学准备室 5 纯水仪 净化试验用水，已保证试验体系的可重复性 6 高压灭菌锅 培养基及接种器械灭菌 7 微波炉 融化培养基，多用于无菌分装 8 电磁炉 培养基配制 9 烘箱 玻璃器皿干燥 10 冰箱 存放培养基母液及植物激素类试剂 11 冰柜 外植体材料前处理、低温驯化、种质保存 12 空调 培养间、仪器工作环境的温度控制 13 各种规格容量瓶 5mL，10 mL，50 mL，100 mL，250 mL，500 mL，1000 mL 14 各种规格量筒 5mL，10 mL，50 mL，100 mL，250 mL，500 mL，1000 mL 15 刻度吸管及支架 0.5 mL，1 mL，2 mL，5 mL，10 mL 16 烧杯、试剂瓶、三角瓶 5mL，10 mL，50 mL，100 mL，250 mL，500 mL，1000 mL 17 培养瓶 300mL带盖耐高压玻璃瓶 500mL带盖耐高压玻璃瓶 18 恒温培养箱 原生质体解离、炼苗 19 试验耗材 滴管、玻璃棒、药匙、称量纸、各种规格移液枪吸头、乳胶手套、封口膜、耐高压橡皮筋 20 试验台 试验仪器放置、试验操作 21 洗池 试验用水、清洗等 缓冲间 序号 仪器名称 备注 1 风淋 工作及参观人员菌尘过滤 2 工作服、口罩、拖鞋 工作及参观人员更换 3 紫外灯 缓冲间消毒 接种间 序号 仪器名称 备注 1 超净工作台 单人单机操作 2 干热消毒器 单人单机操作 3 转椅 单人单机操作 4 双层小推车 单人单机操作 5 紫外灭菌灯 空气灭菌 6 空气净化装置 保持空气流通、洁净 7 空调 工作环境温度控制 培养间 序号 仪器名称 备注 1 光照培养架 包括照明灯，稳压器、自动开关定时器、根据需要定制 2 柜式空调 培养间全程温度控制 3 紫外灭菌灯 培养间重度污染时，移开培养材料后使用 4 空气净化装置 保持空气流通、洁净 接种器械 序号 器械名称 备注 1 不锈钢枪镊 18cm，22cm 2 解剖剪或手术剪 18cm，22cm 3 解剖刀 刀柄、10号或11号刀片 4 解剖针 常规 5 眼科剪 常规 6 接种铲 常规 7 细菌过滤器 直径25mm，孔径0.45μm 8 微孔滤膜 滤器中使用 9 玻璃注射器 与细菌过滤器配套 10 细胞筛 60目，80目，120目，200目 3.教学规划 （1）提前准备：超净工作台（可自制简易）、培养间、MS培养基、组培材料、外植体消毒工具及试剂、接种工具及试剂等 （2）第一课时：学习植物组织培养的有关知识；制定实验方案 （3）第二课时：外植体处理、模拟接种 （4）第三课时：超净台接种、培养室培养 （5）课后观察，记录 （6）第四课时：移栽培养 4.植物组织培养的一般过程 （一）外植体的选择与初步处理 1. 外植体选择 选择优良种质 对试材的选择要有明确的目的，通常选择具有良好的性状特征、或有特殊的基因性的植株，具有一定代表性，可增加适用价值。 2.外植体的初步处理 剪掉植物材料不用的部分，将需用的部分用软的排笔或毛笔蘸浓的肥皂液刷洗干净，自来水下冲去泡沫后剪切成适当大小，转入洁净烧杯中，用纱布或网状物扎口，置于自来水龙头下用流水温和冲洗10－30min。 1 培养基配制 （1）基本培养基及配方 （2）培养基母液的配制 （3）培养基的配制、分装 （4）培养基的灭菌 （二）接种前的准备工作 2. 接种器械及相关用品的灭菌 将解剖刀、解剖剪、枪镊等接种用具同方向打包封好 9cm培养皿10套一包封好 13cm培养皿4个一包封好 量筒、空瓶、废液瓶、待灭菌的蒸馏水等用封口膜封口 高压灭菌锅，121度，15min高压灭菌 3. 超净工作台及接种间的灭菌 清理接种间及工作台内与本试验无关的用品后，用洁净纱布擦拭工作台台面，再用75％酒精完全清理台面一次（包括台面上的消毒器、或酒精灯等），将经过高压灭菌的接种工具包、量筒、培养皿包、封口的废液瓶、封口的空瓶、量筒等放入超净台，拉下挡风玻璃并留2cm缝隙，风速关闭或风速开至最低档，打开工作台内紫外灭菌灯。退出接种间后打开接种间紫外灭菌灯。灭菌时间15~25min. 4.缓冲间灭菌 将接种时用到的工作服、口罩、手套、拖鞋、小推车、经过高压灭菌的物品等整齐摆放在缓冲间，打开紫外灭菌灯，进行紫外线灭毒。灭菌时间15～25min