骨骼肌的单收缩与复合收缩实验.docVIP

1.骨骼肌的单收缩与复合收缩 实验目的 1.熟悉动物机能信号采集系统的使用方法,2.观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系3.观察刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响 实验原理 腓肠肌由许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。当刺激强度过小时，肌肉不发生收缩反应，刺激为阈下刺激。 而能引起肌肉发生收缩反应的最小刺激为阈刺激，刺激的强度称为阈强度，当全部肌纤维同时收缩时，出现最大的收缩反应，引起最大收缩反应的最小刺激强度称为最适刺激强度。肌肉组织对于一个阈上强度的刺激发生一次迅速的收缩反应，称为单收缩。单收缩的过程可分三个时期：潜伏期、缩短期和舒张期。 两个同等强度的阈上刺激，相继作用于神经肌肉标本，如果刺激间隔小于单收缩的时程，则出现两个收缩反应的重叠，称为收缩的总和。 收缩的总和(复合收缩) 不完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的舒张期 完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的收缩期内，各收缩不能分开，肌肉维持稳定的收缩状态 实验对象 蟾蜍或其它蛙类、常用手术器械，蛙板，蛙钉，铜锌弓，毁脊针(探针)，棉线，废物盆，培养皿，玻璃分针，任氏液、MD3000生物信号采集系统，换能器，肌槽，支架 实验步骤 坐骨神经－ 1、 腓肠肌标本的制备2. 连接装置3. 实验观察和记录 单收缩实验 选择阈上刺激强度 刺激方式：单次；波宽：1ms 调节控制面板的输入范围，使观察的肌肉收缩幅度适当 d. 调整时间单位(记录好，不可忘记!)，使收缩曲线成明显的抛物线状 e. 采样 刺激 关键技术 坐骨神经-腓肠肌标本的制备 单收缩实验时，调整好时间单位和刺激强度 连续刺激时刺激强度与频率的选择 注意事项 常用任氏液湿润标本，保持标本的良好活性 肌肉与换能器的连接松紧适当 在做复合收缩实验时，每改变一次刺激频率后，应休息0.5-1 min, 每次刺激不要超过5 秒，以免标本疲劳 2.神经干动作电位的引导及其传导速度的测定 试验目的 掌握蛙坐骨神经-胫腓神经标本的制备方法2. 掌握引导神经干动作电位和测定其传导速度、兴奋不应期的基本原理和方法 实验原理 神经干动作电位是神经兴奋的客观标志，给具有兴奋性的神经干以一定强度的刺激，会发生动作电位。处于兴奋部位的膜外电位负于静息部位。当神经冲动通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时水平。神经干兴奋过程所发生的这种膜电位变化称神经干动作电位。神经干由很多神经纤维组成，故神经干动作电位与单根神经纤维的动作电位不同，它是由许多神经纤维动作电位综合成的综合性电位变化。此外，这是在细胞外记录，与细胞内记录不同。所以，神经干动作电位幅度在一定范围内可随刺激强度的变化而变化。如果两引导电极置于正常完整的神经干表面，当神经干一端兴奋后，兴奋波先后通过两个引导电极处，可记录到两个方向相反的电位偏转波形，称为双相动作电位。如果两个引导电极之间的神经组织有损伤，兴奋波只通过第一个引导电极，不能传导至第二个引导电极，则只能记录到一个方向的电位偏转波形，称为单相动作电位。 动作电位在神经纤维上的传导有一定的速度。不同类型的神经传导速度（υ）各不相同，神经纤维越粗，则传导速度越快。蛙类坐骨神经干中以Aα类纤维为主，传导速度大约35~40m/s。 测定神经冲动在神经干上传导的距离（s）与通过这些距离所需的时间（t），即可根据υ=s/t求出神经冲动的传导速度。 试验步骤 一、制备蟾蜍坐骨神经干标本 方法一：标本制备方法与坐骨神经腓肠肌标本制备方法大体相同。 应注意：神经干应尽可能分离得长一些。要求上自脊椎附近的主干，下沿腓总神经与胫神经一直分离至踝关节附近为止。三、启动生物信号采集处理系统，点击菜单“实验/常用生理学实验”，选择“神经干动作电位。逐渐增大刺激强度，找出刚能引起微小的神经干动作电位的刺激强度（阈强度）。继续增强刺激强度，神经干动作电位也相应增大。找出最大刺激强度。四、测定动作电位传导速度 给予神经干最大刺激强度的刺激，在通道2、4的采样窗中，可观察到先后形成的两个双相动作电位波形。 分别测量从刺激伪迹到两个动作电位起始点的时间，设通道2为t1，通道4为t2（或可直接测量两个动作电位起点的间隔时间），求出t2—t1的时间差值。 测量标本屏障盒中CH2与CH4两对引导电极之间的距离s（应测r1~r2的间距）。 观察和测定单相动作电位波形（在损伤神经标本之前，可先做“神经干动作电位不应期的测定”的实验）。用镊子将CH4两个记录电极之间的神经夹伤或用药物阻断，再刺激时呈现单相动作电位。读出最大刺激时单相动作电位的振幅值和整个动作电位持续时间数值。 比较单相动作电位的上升时间和下降时间的长短，并分析与双相动作电位波形的关系。 3.蛙心的期前收缩与代偿间歇 相关概念 期前收缩：在舒张期内（相对不应 期），