第六节 蛋白质的分离、纯化.pptVIP

一、蛋白质的酸碱性质 蛋白质中的功能团　 末端α－NH2　　 末端α－COOH　　 侧链基团 所以，蛋白质的化学物理性质＝AA A．蛋白质是两性电解质，能和酸或碱发生作用。　B．蛋白质分子的可解离基团来自侧链上的功能团。　C．结合蛋白质 辅基成分包含可解离蛋白质　D．末端α-COOH, α-NH2　E．蛋白质分子中可解离基团的pK和游离AA中相应基团的pK值完全不相同。　　∵在蛋白质分子中受到邻近电荷的影响　F．蛋白质可看作一个多价离子 蛋白质等电点--在某一pH值，蛋白质所带的正电荷与负电荷恰好相等，净电荷为零。这一pH称为蛋白质等电点 等离子点--没有其他盐类干扰时，蛋白质质子供体基团界离出来的质子数与质子 受体基团结合的质子数相等时的pH称等离子点。特征常数。 二．蛋白质分子的大小与形状 ㈥．利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定分子量 ㈥．利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定分子量 蛋白质在各种介质中（PAGE）电泳时，它的迁移率 这样造成两个后果： 　①　SDS为阴离子，多肽链覆盖上相同密度的负电荷超过蛋白质原有的电荷量，因而掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差别。　　　因此，所有SDS-蛋白质复合物，电泳时均以同样的电荷/蛋白质比向正极移动。　② 改变了蛋白质单体分子的构象。 SDS-蛋白质在水溶液中长