耐药上皮性卵巢癌细胞株tov112dddp的her2表达及其相关信号通路分析-expression of her 2 in drug-resistant epithelial ovarian cancer cell line tov 112 dddp and analysis of its related signal pathway.docxVIP

贵阳医学院 2014 贵阳医学院 2014 届硕士研究生学位论文 PAGE PAGE 10 因此，深入讨论卵巢癌对化疗药物耐药的发生、发展过程及相关机制，为临床上耐 药性卵巢癌的治疗奠定了理论基础，对改善卵巢癌患者的预后，提高生存率提供了 可能。 卵巢癌发生、发展的过程与许多蛋白的异常表达有关，如：基质金属蛋白酶 （MMPs）、人表皮生长因子受体（EGFR）、血管内皮生长因子 C（VEGF-C）、端粒 酶、生存蛋白或存活素（Survivin）等。其中 EGFR 家族成员 Her2（ human epidermal growth factor receptor 2），因为其特殊的生物学特性而成为研究的重点之一。 Her2，是原癌基因 neu 编码的一种单链受体蛋白，分子量为 185KD，因此又名 p185 蛋白。1974 年，Schubert[2]的研究发现，将乙基亚硝脲注射到大鼠的脑内， 增加了其后代患神经系统肿瘤的可能性。1981 年，Shin 等在注射了乙基亚硝脲的 大鼠脑内所患神经系统肿瘤中发现了原癌基因 neu。之后 Padly 等进一步证实，原 癌基因 neu 和 EGFR 基因均与病毒癌基因（V-erbB）具有同源序列。因此，将 EGFR 基因命名为 c-erbB-1 即 Her1，将 neu 基因命名为 c-erbB-2 即 Her2。后来，人们 又相继发现了 c-erbB-3（Her3），c-erbB-4（Her4）等，组成了人表皮生长因子 受体（EGFR）家族。EGFR 家族成员均是具有酪氨酸激酶活性的生长因子受体。 Her2 蛋白在结构上含有三个功能单位，即一个半胱氨酸富集的胞外配体结合 区（extracellular domain,ECD），一个具有亲脂性的跨膜区，一个具有酪氨酸激 酶活性的胞内区。Her2 的胞外区结构特殊，其子域 I 和Ⅲ可紧密结合，从而导致 子域Ⅱ和Ⅳ之间形成外展二聚化环结构，以便形成同源二聚体或与家族其他成员形 成异源二聚体[3]。虽然目前的尚未发现能与 Her2 直接结合的配体，但研究发现， 与 EGFR 家族其他成员如 Her1、Her3、Her4 结合的配体可以激活 Her2。结合了表 皮生长因子（EGF）、双向调节因子（AR）、转化生长因子（TGF α）及肝素结合 EGF 样生长因子（HB-EGF）等细胞因子的 Her1、Her3 或 Her4，与 Her2 形成异源二 聚体，从而使 Her2 胞内区酪氨酸残基磷酸化而被激活。磷酸化后的 Her2 作用于特 定的信号蛋白，诱导下游蛋白的磷酸化而激活多条信号通路，并通过相关的细胞信 号通路调节细胞的增殖、凋亡、黏附等过程。另外，在缺乏配体刺激的条件下，Her2 自身亦可形成同源二聚体而保持其内源性酪氨酸激酶活性，从而通过相关信号通路 调节其特定的细胞过程。 近年来研究发现，在正常情况下，Her2 处于非激活状态，在正常组织中只有微 弱的表达，参与调节细胞的正常分化，是细胞生理功能及代谢不可缺少的重要因素。 在某些因素的刺激下，野生型 Her2 基因发生突变而异常扩增，蛋白异常表达，通 过一定的信号传导通路，调节细胞的增殖、分化、迁移、黏附、凋亡等多个过程， 使细胞周期延长、增殖异常加快、凋亡受到抑制，从而促进了肿瘤细胞增殖和出现 对化疗药物耐受等现象。研究发现，Her2 在卵巢癌、乳腺癌、胃癌、食管癌等多 种恶性肿瘤中均过度表达。Her2 原癌基因的扩增和蛋白的过度表达与卵巢癌 FIGO 分期、组织学分级、残留灶大小及病理学类型间有相关性[4]。目前，Her2 已经成为 判断预后的重要指标及抗癌治疗最有意义的靶标。 研究发现，化疗会导致上皮性卵巢癌耐药，增加了其复发和转移的可能。尤其 是 Her2 过表达的上皮性卵巢癌更容易产生对化疗药物的耐受性[5-8]。鲁艳明等[9]用 RNA 干扰的方法特异性抑制卵巢癌细胞株 SKOV3 中 Her2 蛋白的表达，结果表明， 和对照组相比，抑制 Her2 表达可诱导细胞凋亡，增加其对顺铂的敏感性。这表明， Her2 引起相关基因的改变，可能是卵巢癌对化疗药物耐受的机制之一。 目前的研究表明，Her2 参与调节的细胞信号通路主要包括信号转导子与转录 激活子（Signal Transducers and Activators of Transcription,STATs）信号通 路、磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶 B/Akt(Phosphatidylinositol 3 kinase protein kinase B/Akt,PI3-PKB/Akt)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen activated protein kinase,MAPK）信号通路等。在卵巢癌的相关研究中