神经干细胞的研究现状与应用前景课件.ppt

神经干细胞的研究现状与应用前景;主 要 内 容;基本知识;干细胞（Stem cell，SC）是一类具有自我更新（self-renewing）能力的多潜能细胞，即干细胞保持未定向分化状态和具有增殖能力，在合适的条件或给予合适的信号，它可以分化成多种功能细胞或组织器官，医学界称其为“万用细胞”，也有人通俗而形象地称其为“干什么都行的细胞”。 干细胞来源于胚胎、胎儿组织和成年组织如骨髓、脐带等。干细胞技术最显著的作用就是：能再造一种全新的、正常的甚至更年轻的细胞、组织或器官。 干细胞技术是近年现代生物科技继克隆技术、基因工程之后的第三大科学成就。 它不仅促使人们重新熟悉细胞生长与分化的基本生命原理，也为多种难治性疾病的治疗带来了划时代的革命。21世纪是生命科学的时代，也是为人类的健康长寿创造世界奇迹的时代，干细胞的应用将有广阔前景。 ;神经干细胞的定义;;神经干细胞的特征;神经干细胞的分类;2.根据部位分类主要有两类： 神经嵴干细胞(neuralcreststemcell，NC-SC)和中枢神经干细胞(CNS-SC)。　 NCSC为外周神经干细胞(PNS-SC)，既可发育为外周神经细胞、神经内分泌细胞和Schwann氏细胞，也能分化为色素细胞(pigmented cell)和平滑肌细胞等。NSC一般是指存在于脑部的中枢神经干细胞(CNS-SC)，其子代细胞能分化成为神经系统的大部分细胞。;胚胎期： 　神经干细胞主要分布在大脑的皮层、纹状体、海马、室管膜下层和中脑等区域。 成年期： 　中枢神经系统仍有神经干细胞存在，只不过这些细胞平时处于静止状态。成年脑区神经干细胞主要局限在海马齿状回、纹状体和环绕侧脑室的室脑膜下层。;海马齿状回;侧脑室的室脑膜下层 ;尾状核;成年神经干细胞的研究现状; 以前的观点认为成年大脑中的神经元数量是稳定不变的，由这些神经元构成的神经网络结构是相对稳定的，神经结构上的可塑性仅发生在树突、轴突和突触等部位。而目前对神经再生和成年神经干细胞的研究增加了新的认识。;;;小结;成年神经干细胞对脑损伤的修复作用; 正常情况下，成年啮齿类动物大脑中有大量的新生神经元不断产生，显然这些细胞是来补充已经缺失的神经元，这样成年大脑神经元数目才能保持相对稳定。研究表明在成年大脑神经再生区域里存在着普遍的神经元凋亡现象。神经再生活跃区域的死亡细胞数倍于大脑其他部位，因而干细胞增殖、祖细胞迁徙并且分化成神经元从而替代死亡的神经元。有人推测，中枢神经系统变性疾病形成的原因就是由于内源性神经干细胞不能对这些疾病产生的信号起反应，内源性神经干细胞不能替代变性的神经元，而最终导致老年性疾呆，癫痫，精神分裂症等神经系统退行性疾病的发生。 ; 1. 成年神经再生和早期发育中的神经生成有哪些不同？ 2. 为什么神经再生只存在于成年大脑的某些特定的区域？ 3. 这些区域的局部微环境对成年神经干细胞的迁徙和分化有些什么影响？ 4. 成年大脑的神经可塑性的功能意义？ 5. 神经干细胞和认知等高级功能神经活动的关系？ ;研究方法;来源于神经组织：目前从哺乳动物胚胎期大部分脑区、成年期的脑室下区、海马回的颗粒下层、脊髓等部位均成功分离出神经干细胞 来源于胚胎：胚胎干细胞( embryonic stem cells ,　ESCs) 、胚胎生殖细胞( embryonic germ cells ,　EGCs) 等细胞的定向诱导分化而来。 来源于血液系统：骨髓间质干细胞( bonemarrow mesenchymal stem cell s ,　MSCs) 、成年多能祖细胞( multipotent adult progenitor cells ,MAPCs) ［10］ 及脐血细胞(umbilical cord blood) ［11］ 。 来源于永生化细胞系：C17. 2 细胞系［12］ 、MHP36 细胞系［13］ 、N T2 细胞系。 体核细胞转移技术获得神经干细胞：将体细胞核植入去核的卵母细胞浆中,再程序化后形成治疗性克隆,让其发育到一定阶段后在相应部位获得神经干细胞,可重建组织相容性。 ;（1）反复传代法：取3～4个月龄的人胚胎纹状体或孕 14～16天小鼠、大鼠胚胎大脑，机械分离制作单细胞悬液。在含多种神经因子的无血清培养基中培养，实现NSC的体外稳定有效扩增。经过长期培养反复传代可使NSC得到纯化。 （2）流式细胞术：Sasaki等采用流式细胞仪对约60种细胞表面抗原进行筛选，结果发现分选出的具有CD133+/CE34+/CD45-（细胞表面抗原）的细胞为NSC。 （3）基因转导：Keyoung 等利用腺病毒为载体,将置于归巢素和Msi1增强子和启动子控