沙冬青低温胁迫全长cdna文库构建及amdhn和amrd22基因克隆-construction of full-length cdna library of ammopiptanthus mongolicus under low temperature stress and cloning of amd hn and amrd 22 genes.docxVIP

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2018-07-31 发布于上海
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沙冬青低温胁迫全长cdna文库构建及amdhn和amrd22基因克隆-construction of full-length cdna library of ammopiptanthus mongolicus under low temperature stress and cloning of amd hn and amrd 22 genes.docx

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沙冬青低温胁迫全长cdna文库构建及amdhn和amrd22基因克隆-construction of full-length cdna library of ammopiptanthus mongolicus under low temperature stress and cloning of amd hn and amrd 22 genes

目录 HYPERLINK \l _bookmark0 1 引言 1 HYPERLINK \l _bookmark1 1.1 植物抗寒性研究进展 1 HYPERLINK \l _bookmark2 1.1.1 植物抗寒性的生理基础 1 HYPERLINK \l _bookmark3 1.1.2 植物抗寒性分子机理及抗寒基因研究 3 HYPERLINK \l _bookmark4 1.2 全长 cDNA 文库及其应用 5 HYPERLINK \l _bookmark5 1.2.1 全长 cDNA 文库的构建方法 5 HYPERLINK \l _bookmark6 1.2.2 全长 cDNA 文库的应用 7 HYPERLINK \l _bookmark7 1.3 脱水素基因的研究进展 7 HYPERLINK \l _bookmark8 1.4 rd22 研究进展 8 HYPERLINK \l _bookmark9 1.5 沙冬青抗逆性研究进展 8 HYPERLINK \l _bookmark10 1.5.1 形态特征 8 HYPERLINK \l _bookmark11 1.5.2 细胞学基础 9 HYPERLINK \l _bookmark12 1.5.3 抗冻蛋白 9 HYPERLINK \l _bookmark13 1.5.4 抗寒基因的分离与鉴定 10 HYPERLINK \l _bookmark14 1.6 本研究的目的与意义 11 HYPERLINK \l _bookmark15 2 蒙古沙冬青低温胁迫 SMART cDNA 文库构建及序列分析 11 HYPERLINK \l _bookmark16 2.1 材料与方法 11 HYPERLINK \l _bookmark17 2.1.1 实验材料 11 HYPERLINK \l _bookmark18 2.1.2 实验方法 13 HYPERLINK \l _bookmark19 2.2 结果与分析 22 HYPERLINK \l _bookmark20 2.2.1 总 RNA 提取及 mRNA 分离纯化纯化 22 HYPERLINK \l _bookmark21 2.2.2 SMART 全长 cDNA 文库的构建 23 HYPERLINK \l _bookmark22 2.2.3 文库环化及阳性克隆的筛选 24 HYPERLINK \l _bookmark23 2.2.4 文库测序及序列分析 25 HYPERLINK \l _bookmark24 2.3 讨论 25 HYPERLINK \l _bookmark25 3 AmDHN 基因的克隆及其转化拟南芥 26 HYPERLINK \l _bookmark26 3.1 实验材料与方法 26 HYPERLINK \l _bookmark27 3.1.1 实验材料 26 HYPERLINK \l _bookmark28 3.1.2 实验方法 27 HYPERLINK \l _bookmark29 3.2 结果与分析 32 HYPERLINK \l _bookmark30 3.2.1 基因克隆与序列分析 32 HYPERLINK \l _bookmark31 3.2.2 植物表达载体的构建 36 HYPERLINK \l _bookmark32 3.2.3 转基因拟南芥的获得与分子检测 36 HYPERLINK \l _bookmark33 3.3 讨论 38 HYPERLINK \l _bookmark34 4 AmRD22 基因的克隆及其表达载体构建 39 HYPERLINK \l _bookmark35 4.1 材料与方法 39 HYPERLINK \l _bookmark36 4.1.1 酶及试剂 39 HYPERLINK \l _bookmark37 4.1.2 培养基及溶液的配制： 39 HYPERLINK \l _bookmark38 4.1.3 实验中用到的引物： 39 HYPERLINK \l _bookmark39 4.1.4 实验方法 40 HYPERLINK \l _bookmark40 4.2 结果与分析 45 HYPERLINK \l _bookmark41 5’RACE 扩增结果 45 HYPERLINK \l _bookmark42 AmRD22 全长 cDNA 的扩增结果 45 HYPERLINK \l _bookmark43 4.2.3 AmRD22 蛋白序列分析 46 HYPERLINK \l _bookmark44 4