塞来昔布对skbr3细胞增殖、凋亡及nucleostemin表达的影响-effect of celecoxib on proliferation, apoptosis and nucleus expression of skbr _ 3 cells.docxVIP

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2018-07-29 发布于上海
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塞来昔布对skbr3细胞增殖、凋亡及nucleostemin表达的影响-effect of celecoxib on proliferation, apoptosis and nucleus expression of skbr _ 3 cells

geneinmaintainingproliferationofthesecellsremainsunclear.Celecoxib,aselectivecyclooxygenase-2inhibitor,wasusedinthisresearchtoobserveitseffectonculturedhumanbreastcancercelllineSkbr3thathighlyexpressedHER-2/neu.Themethodsassociatedwithcellproliferationandapoptosiswereapplied,suchas,observationonapoptoticmorphologicalchange,MTTassay,thetestfortheactivityofcaspase3,evaluationonapoptoticrate,cellcyclebyFlowcytometry(FCM).ExpressionofNSproteinandassociatedproteinweredetectedbyimmunefluorescentstainingandWestern-blot.ResultsshowthatthegrowthofSkbr3cellswasinhibitedbycelecoxibinaconcentrationdependentmanner.CelecoxibcouldupregulatetheexpressionofNSproteinandP53proteinandsimultaneouslydownregulatetheexpressionofCOX-2proteinandCyclinD1protein.Morphologicalobservationindicatesthatcelecoxib-treatedcellsshowseveraltypicalapoptoticfeatures.MeanwhilethetypicalapoptosispeakisdetectedbyFCM.ThechangeofapoptoticrateandcellcyclewereconcentrationdependentmannerandthecellpercentageinG0/G1phaseincreased.WeconcludedthattheeffectofcelecoxibonSkbr3cellsmightberelatedwithmodulatingNSexpression.Keywords:Celecoxib;Skbr3cells;proliferation;apoptosis;Nucleostemin;MTT;Westernblot;Flowcytometry独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本文完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□，在年解密后适用本授权书。不保密□。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日前言乳腺癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤疾病，近年来，在世界范围内发病率一直居高不下，尤其在中国，据报道近10年我国乳腺癌发病率增加了47%，已由女性恶性肿瘤中的第2位跃居到首位，其中20%～30%的患者中Her-2/neu原癌基因存在高表达，Her-2/neu即人表皮生长因子受体-2，阳性表达者恶性程度高，病情发展迅速，预后不良[1]，不仅其临床特点和生物学行为有特殊表现，而且治疗模式也与其它类型的乳腺癌有很大的不同。环氧合酶（cyclooxygenase,COX）是催化花生四烯酸合成前列腺素（PGs）的关键酶。在哺乳动物，目前已发现的环氧合酶至少有两种同工酶：COX-1及COX-2。COX-1在体内大多数正常组织呈结构性表达，参与包括维持胃肠道内环境稳定及血小板聚集等多种生理过程。而COX-2作为一种诱导型酶，在正常生理情况下只表达于中枢神经系统，眼和肾脏，但是一旦受到刺激因子（如生长因子，促瘤剂，癌基因等）的作用能迅速合成并表达[2]。研究发现COX-2在胃肠道恶性肿瘤