若干樟科植物生斑痣盘菌目分类学与该目双基因系统发充学初步研究-a preliminary study on taxonomy of some species of camphorata from lauraceae and the phylogeny of the two genes in this order.docxVIP

独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:褂看加快时间:/3年6月1日关于论文使用授权的说明本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名:如法布ψ时间:J$年6月l日.第一导师签名:斗非庐:你时间:813年1月/R.摘要本研究主要分为三部分内容。第一部分主要是采用传统分类学方法，对樟科植物上的斑痣盘菌进行了分类学系统研究。通过对安徽农业大学森林菌物保藏室（AAUF）保存的真菌材料进行初步检查与整理，并选取相关标本进行深入研究，共鉴定出樟科植物生斑痣盘菌目3属4种，其中2个为新种，分别是奇异皮下盘菌Hypodermamirabile和新木姜子齿裂菌Coccomycesneolitseae。通过显微镜外部观察及冰冻切片内部显微检查，对这二个新种的外部形态学特征，内部结构特征等进行了研究，并作了详细的中英文描述，且附有子囊果外表及生境、子囊、子囊孢子及侧丝结构等的点线合成图。同时对这些种的地理分布、生态生境等进行了调查研究；第二部分主要是对采自国内的斑痣盘菌目部分成员进行了分离培养，菌种转接保藏，单点性状培养，玻璃纸菌丝培养等实验，研究分析了其生物学性状。结果显示三种不同培养基上同一菌株的生长情况不尽相同，同一物种不同菌株的培养性状有的相似，有的则不同。一般来说，在营养匮乏的培养基上，容易产生分生孢子器及线纹黑壳等，而营养丰富的培养基上，则气生菌丝等较为发达；有的菌株还会分泌红色、黄色水溶性色素等。根据结果可以推测环境条件、寄主等都会对物种生长产生影响，特别是物种所处的环境的营养条件。第三部分主要是对来源于全国各地斑痣盘菌目成员进行了系统发育学初步研究，运用分子生物学及生物信息学相结合的方法，利用DNA条形码技术，基于rDNA-ITS和28SrDNA单独序列，二基因联合序列构建系统发育树来探讨该目属间、种间及种内的亲缘关系。采用CTAB法提取供试菌株的DNA，通过PCR扩增及测序，将所得的序列在GenBank上进行比对（blast），选取合适的序列，以柔膜菌目的Leotialubrica为外群，分别构建了系统发育树，结合形态学分类方法，确定物种分类地位。结果显示，在斑痣盘菌目中，同一属、种的菌株通常会优先聚在一起，但一些表型性状相似，却分隶于两个不同属、种的也有可能聚在一起。本次研究表明，菌物的鉴定不能仅仅依靠单一方法，而需要将多种生物技术结合在一起，即以形态学分类为基础，综合其个体发育、培养性状、多基因综合分析才能准确地进行菌物分类，确定其系统发育关系。分子生物学作为菌物分类研究的辅助手段，因其快速，准确等特点，越来越凸显其重要性，另外，为了使研究结果尽量准确，需尽快完善真菌DNA条形码技术，加快真菌DNA条形码数据库的建立与优化。虽然分子生物学的方法在真菌分类上有着举足轻重的作用，但是由于真菌的遗传变异多样性等特点，传统的形态学分类还应该是真菌分类的最主要依据与方法。关键词：真菌分类，形态学，培养生物学，生态学，双基因序列分析AbstractThisresearchincludesthreeparts.ThetaxonomyofRhytismatalesonlauraceaeplantswasmainlystudiedusingthetraditionaltaxonomicmethodinthefirstpart.AfterthesortingandinspectionofthesamplesfromtheForestFungiDriedReferenceCollectionofAnhuiAgriculturalUniversity(AAUF),4speciesfrom3generaofRhytismatalesparasiticingonlauraceaeplantswereidentified,ofwhichtwonewspeciesHypodermamirabileandCoccomycesneolitseaewerepreliminarilyestablishedbyexternalexaminationandinternalmicroexaminationoffrozensection