0406 细胞的冻存、复苏与运输.pptVIP

细胞工程 Chapter 4 Animal Cell Culture ◆ Biology of cells in culture ◆ Fluid for cell culture ◆ Standard cell culture techniques ◆ Establishing a cell line or cell strain ◆ Cell freezing and recovery ◆Animal Cell Engineering◆ Section 5：细胞的冻存、复苏和运输 1.细胞冻存 细胞低温冷冻贮存是细胞室的常规工作。细胞冻存与细胞传代保存相比可以减少入力、经费，减少污染，减少细胞生物学特性变化。 2.细胞复苏 在体外培养工作中，常要将体外培养物进行冷冻保存，在需要时再复温融解进行体外培养（复苏）。 细胞的冻存与复苏 要获得好的冻存与复苏效果，必须了解如下几个问题：冷冻速率、复温速率、冷冻保护剂，冷冻保存温度。 冷冻速率：慢冻（？） 复苏速率：快融（？） 冷冻保护剂：5－15％甘油或二甲基亚砜（DMSO） （？） 冷冻保存温度：－196 ℃（液氮） 对大多数有核哺乳类动物细胞来说，在不加冷冻保护剂的情况下，无最适冷冻速率可言，也不能获得活的冻存物。 目前冷冻保护剂可分为渗透性和非渗透性两类。 具有渗透性的冷冻保护剂可以渗透到细胞内，一