山豆根药材的质量研究分析-quality analysis of radix sophorae tonkinensis.docx

5 5 HYPERLINK \l _bookmark0 4 指纹图谱的建立及技术参数 41 HYPERLINK \l _bookmark1 4.1 空白基线 41 HYPERLINK \l _bookmark2 4.2 延长冲洗试验 41 HYPERLINK \l _bookmark3 4.3 参照色谱峰的建立 41 HYPERLINK \l _bookmark4 4.4 各批山豆根药材的指纹图谱采集 42 HYPERLINK \l _bookmark5 4.5 指纹图谱与共有峰的确定 45 HYPERLINK \l _bookmark6 4.6 共有峰与非公有峰面积比 51 HYPERLINK \l _bookmark7 4.7 山豆根药材指纹图谱相似度评价 52 HYPERLINK \l _bookmark8 5 讨论 53 HYPERLINK \l _bookmark9 5.1 样品的特性 53 HYPERLINK \l _bookmark10 5.2 色谱柱的选择 54 HYPERLINK \l _bookmark11 5.3 检测波长的选择 54 HYPERLINK \l _bookmark12 5.4 指纹共有峰的标定 55 HYPERLINK \l _bookmark13 5.5 参照峰的选择 55 HYPERLINK \l _bookmark14 5.6 实验创新点与不足 55 HYPERLINK \l _bookmark15 参 考 文 献 56 HYPERLINK \l _bookmark16 综述 58 HYPERLINK \l _bookmark17 致 谢 77 HYPERLINK \l _bookmark18 攻读学位期间发表的学术论文目录 78 HYPERLINK \l _bookmark19 广西中医学院研究生学位论文作者声明 79 HYPERLINK \l _bookmark20 个 人 简 历 80 PAGE PAGE 10 中文摘要 目的：以不同产地山豆根为研究对象，建立山豆根药材的质量评价方法， 为科学评价和有效控制山豆根药材的质量提供理论依据。 方法：采用薄层色谱法对市售的山豆根进行定性鉴别；采用雷氏盐剩余 比色法测定山豆根总生物碱的含量；采用正交试验对山豆根药材的水提 取条件进行优化；采用 HPLC 法测定山豆根药材中有效成分氧化苦参碱 的含量；采用 HPLC 法建立山豆根药材的指纹图谱。 结果：1、山豆根的薄层色谱中，苦参碱、氧化苦参碱斑点清晰，易于识 别，与对照品色谱图相应位臵上显相同的橘红色斑点。2、用定量并过量 的雷氏盐试液与山豆根药材提取液反应生成沉淀，测定其剩余的雷氏盐 试液本身在 518nm 处的吸收度，以△A=A 雷氏盐空白－A 样品为定量依据。结 果表明：山豆根药材提取液在 0.01936～0.1162（mg/ml）范围内，△A 与 浓度呈良好线性关系，r=0.998(n=5)，平均回收率为 103.62%，RSD 为 0.75%(n=6)。3、最佳提取工艺为加水 10 倍，煎煮 1 小时，煎煮 3 次。4、 HPLC 法测定山豆根药材中有效成分氧化苦参碱的含量：以甲醇–水相 （0.2%磷酸+0.32%三乙胺）3∶97 为流动相，流速 1ml/min，检测波长 220nm。结果表明氧化苦参碱在 0.692～5.536μg 之间与峰面积呈良好的线 性关系（r=0.9999，n=5），平均回收率为 99.29%，RSD 为 2.7%(n=6)。5、 HPLC 法建立指纹图谱：检测波长 24min 后由 220nm 转换到 280nm，梯 度洗脱，氧化苦参碱为参照峰，在 75min 内记录药材的指纹图谱。 结论：对山豆根药材进行了 TLC 鉴别研究，结果可作为鉴别药材真伪的 参考依据。通过比较不同产地山豆根药材中总生物碱、氧化苦参碱的含 量，为寻找最佳生长区域提供依据。所建立的雷氏盐剩余比色法测定山 豆根总生物碱含量专属性强，重现性好；HPLC 法测定山豆根氧化苦参碱 含量灵敏度高，重现性好。所建立的 HPLC 指纹图谱有较强的针对性， 为山豆根的研究开发以及制定山豆根的质量标准提供了科学的依据。 关键词：山豆根；TLC；雷氏盐；水提取工艺；HPLC；指纹图谱 Study on quality control the medical material of Sophora tonkinensis Gagnep. ABSTRACT Objective: Take the Sophora tonkinensis Gagnep. in different growin