高效液相色谱法应用讲座ppt课件.pptVIP

高效液相色谱法应用讲座;1、HPLC概述 ;HPLC实验操作应知;1 概述 ;定义;仪器结构简介;;;附：高效液相色谱仪流程图;1.2 HPLC分离模式与主要分离机制;正相色谱法与反相色谱法;正相与反相;;1.3特点;;; 安全：仅有一些有机溶剂的污染（使用时，流动相口要密封，一者以免挥发，流动相中各组分比例不准，二者防止挥发，污染环境），比气相要安全的多。 ;1.4 思考;影响分离的因素;思考;2、HPLC操作操作流程;流动相的配制;;;流动相为什么要脱气;常用的脱气方法比较;常用的脱气方法比较;压力、温度与气泡;防止产生新的气泡;为什么要滤除微粒;流动相的贮存;流动相的贮存;6，流动相常用溶剂的极性和截止波长 由极性可以看出，在反相色谱中，要使出峰时间加快，可增加流动相中的乙腈比例，但要注意分离度的减小；若要使出峰时间减慢，可增加流动相中水的比例，增加水的比例还会引起分离度的增加；两者之间综合来考虑。四氢呋喃使用时注意波长。必须选用色谱级的。 ; 由于甲醇的极限波长为210nm左右，故短波长测定时，最好不要采用甲醇，而用乙腈。 样品稀释用溶剂的选择：测定有关物质时最好选用流动相，避免以溶剂峰的干扰，水往往出倒峰。;流动相的pH值;;流动相的配制;思考