基因结构与功能分析技术课件.pptxVIP

第二十二章基因结构与功能分析技术人类的多种疾病都与基因的结构或功能异常有关，因此，要阐明疾病发生的分子机制和进行有效的诊断与防治，均需首先揭示基因的结构与功能。DNA序列测定基因转录起点及其启动子的分析基因编码序列的分析基因拷贝数及其表达产物的分析基因功能获得和/或缺失策略随机突变筛选策略第一节 基因结构分析技术一、基因一级结构解析技术 基因的一级结构是指脱氧核苷酸的排列顺序，解析一级结构最精确的技术就是DNA测序（DNA sequencing）。 Sanger双脱氧法测序原理Maxam-Gilbert化学降解法测序原理三、基因启动子结构分析技术 DNase I足迹法的原理第二节基因表达产物分析技术一、通过检测RNA而在转录水平分析基因表达 核糖核酸酶保护实验的原理二、通过检测蛋白质/多肽而在翻译水平分析基因表达 蛋白质印迹技术酶联免疫吸附实验免疫组化实验流式细胞术蛋白质芯片和双向电泳第三节基因的生物学功能鉴定技术一、用功能获得策略鉴定基因功能 基因功能获得策略的本质是将目的基因直接导入某一细胞或个体中，使其获得新的或更高水平的表达，通过细胞或个体生物性状的变化来研究基因功能。 转基因技术转基因技术（transgenic technology）是指将外源基因导入受精卵或胚胎干细胞（embryonic stem cell），即ES细胞，通过随机重组使外源基因插入细胞染色体DNA，随后