山羊流产前后细胞因子和血凝状态变化的分析-analysis of changes of cytokines and blood coagulation status before and after goat abortion.docxVIP

摘 要 课题研究了山羊流产前后外周血液中 Th1/Th2 细胞因子及血凝状态的变化，分析细胞因子 及血凝指标的变化规律，探讨其生理学意义，为提高山羊繁殖效率及胚胎移植妊娠率提供理论 依据，为临床实践提供新的思路。 选择 25 只临床健康发情周期正常的经产未孕白山羊母羊为试验动物，第三次自然发情后本 交配种，20 只妊娠。在妊娠第 60d 时分别颈部肌肉注射 PG0.2mg/只，隔 24h 再注射 0.1mg/只， 结果，在第二次注射 PG12～24h 内，20 只试验羊全部发生流产，流产率 100%。于注射 PG 前 （妊娠第 60d）和流产第 1、3、8、10d 采集外周血液，分离血清和血浆。应用血细胞计数板， 光学显微镜下计数血液中血小板（PLT）和白细胞（WBC）数量；应用 ELISA 方法检测血清中 肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素 10（IL-10）和 D-二聚体（D-D）含量；应用凝固法测 定血浆中凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）和纤维蛋 白原含量（FIB）。并对流产山羊的胎盘组织进行 Mallory 磷钨酸-苏木素（PTAH）染色，光学 显微镜下进行组织学观察。 结果表明：山羊流产后 PLT 低于流产前数量，差异显著（P0.05），流产后 PLT 数量先降 低后升高，流产第 3d 时达最低值（385.63×109/L）；流产第 1、3d 时 WBC 明显升高，差异极 显著（P0.01），妊娠第 8、10d 时 WBC 有所下降，但仍显著高于流产前的数量（P0.05）。山 羊血清中 TNF-α 含量在流产的第 1、3、8、10d 均极显著高于流产前含量（P0.01），流产第 1、 3d 逐渐升高，第 8、10d 逐渐降低，以流产第 1d 的水平最低（38.705±7.235pg/mL），第 3d 最高 （59.074±14.239 pg/mL）；血清 IL-10 含量在流产后第 1d 时低于流产前含量，差异显著（P0.05）， 流产第 3、8、10d 时含量继续降低，极显著低于流产前和流产第 1d 时的含量（P0.01）。PT 在 流产第 1d 时显著短于流产前时间（P0.05），流产第 3、8d 时 PT 继续缩短，极显著短于流产 前时间（P0.01），流产第 10d 时 PT 有所延长，但仍极显著短于流产前时间（P0.01）； APTT 在流产第 1d 时显著短于流产前时间（P0.05），流产第 3d 时 APTT 降到最低值（16.63±2.05s）， 极显著短于流产前时间（P0.01），流产第 8d 和第 10d 时 APTT 有所升高，但仍极显著短于流 产前时间（P0.01）；TT 在流产后先缩短后延长，在流产第 3d 时达到最低值(6.06±0.53s)；FIB 含量在山羊流产后先升高后降低，在流产第 8d 时达到最高值（325±7.74 mg/dL）；D-D 含量在 山羊流产后第 1d 时显著高于流产前含量（P0.05），流产第 3d 和第 8d 时 D-D 继续升高，极显 著高于流产前含量（P0.01），流产第 10d 时 D-D 有所降低，但仍极显著高于流产前含量 （P0.01）。结论：（1）在山羊妊娠第 60d 时，先肌肉注射 PG0.2mg，间隔 24h 再注射 0.1mg， 可成功建立山羊流产模型。（2）山羊流产前后 PLT 和 WBC 呈现规律性的变化；流产后 PLT 明显降低，WBC 则显著升高。（3）TNF-α 和 IL-10 在流产前后呈现规律性的变化；TNF-α 含量 流产后较流产前升高，IL-10 含量流产后较流产前降低；TNF-α 与 IL-10 变化趋势相反。（4）山 羊流产前后血凝指标发生了规律性变化，PT、APTT、TT 在流产后较流产前都明显降低，后又 逐渐升高，变化趋势相同；流产后 FIB 和 D-D 含量较流产前显著升高，两者之间变化趋势相同， 但和 PT、APTT、TT 变化趋势相反。（5）山羊流产后发生了炎症反应，血凝状态有增强的趋势， 并有弥散性血管内凝血（DIC）形成倾向。 关键词：细胞因子；血凝状态；DIC；流产前后；山羊 The dynamic changes of cytokines and blood coagulation status before and after abortion on goats Author: Han Xudong Advisor: Prof. Li Tieshuan Major: Clinical Veterinary Medicine Abstract The dynamic changes of Th1/Th2 cytokines and blood coagu