KAI1基因在人肺癌细胞株中表水平及调控机制的研究.ppt

* * KAI1基因在人肺癌细胞株中表达水平及调控机制的研究＊ ＊本研究受到国家自然科学基金重点项目（N0和天津市科技支撑计划重点项目（No. 06YFSZSF05300）资助 尤嘉琮1 赵颖2 陈 军1 马 力1 朱大兴1 周清华 1 1、天津医科大学总医院天津市肺癌研究所 2、四川大学华西医院肿瘤中心 一、研究不同组织学类型的人肺癌细胞株和正常人肺成纤维细胞株MRC-5中KAI1的mRNA表达水平及其差异 二、研究不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞株中KAI1的mRNA表达水平，探讨KAI1与nm23-H1在调控肺癌转移中的相互关系 三、研究甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肺癌细胞株L9981、GLC-82和NCI-H460中KAI1的mRNA表达水平和体外增殖能力的影响 研究目的 主要材料与方法 实验用细胞株： MRC-5：正常人肺成纤维细胞株 L9981：人高转移大细胞肺癌细胞株 L9981-nm23-H1：稳定转染nm23-H1基因的L9981细胞株 NL9980：人低转移大细胞肺癌细胞株 肺腺癌细胞株：A549、GLC-82、A2，SPCA-1和LTEP-?-2 人大细胞肺癌细胞株：NCI-H460 人小细胞肺癌细胞株：SH-77和NCI-H446 肺鳞癌细胞株：YTMLC-90 主要实验方法： 实时荧光定量PCR MTT法绘制细胞生长曲线 甲基化抑制剂： 5-杂氮脱氧胞苷 (5-Aza-CdR) 实 验 结 果 比较MRC-5与不同组织类型肺癌细胞株间KAI1基因mRNA表达水平 1. MRC-5 , 正常人肺成纤维细胞株； 2. L9981, 人高转移大细胞肺癌细胞株；3. NL9980,人低转移大细胞肺癌细胞株； 4. L9981-nm23-H1-pEGFP，稳定转染nm23-H1的L9981细胞株； 5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌细胞株； 9. NCI-H460，人大细胞肺癌细胞株； 10. SH-77，11. NCI-H446，人小细胞肺癌细胞株； 12. LTEP-?-2，肺腺癌细胞株; 13. YTMLC-90，肺鳞癌细胞株； P=0.000~0.002 不同细胞株间KAI1基因表达水平比较的P值表 Cell lines Cell lines L9981 NL9980 L9981-nm23-H1 A549 GLC-82 A2 SPCA-1 NCI-H460 SH-77 NCI-H446 LTEP-?-2 YTMLC-90 MRC-5 0.000 0.002 0.002 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 L9981 0.000 0.000 0.000 0.000 0.002 0.000 0.651 0.000 0.000 0.007 0.000 NL9980 0.892 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.008 0.000 0.000 L9981-nm23-H1 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.012 0.000 0.000 A549 0.717 0.211 0.111 0.000 0.000 0.005 0.078 0.392 GLC-82 0.368 0.054 0.000 0.000 0.002 0.155 0.227 A2 0.007 0.001 0.000 0.000 0.588 0.040 SPCA-1 0.000 0.000 0.167 0.002 0.443 NCI-H460 0.000 0.000 0.002 0.000 SH-77 0.000 0.000 0.000 NCI-H446 0.000 0.037 LTEP-?-2 0.012 1. MRC-5 , 正常人肺成纤维细胞株；2. L9981, 人高转移大细胞肺癌细胞株；3. NL9980,人低转移大细胞肺癌细胞株； 4. L9981-nm23-H1-pEGFP，稳定转染nm23-H1的L9981细胞株； 5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌细胞株； 9. NCI-H460，人大细胞肺癌细胞株； 10. SH-77，11. NCI-H446，人小细胞肺癌细胞株； 12. LTEP-?-2，肺腺癌细胞株; 13. YTMLC-90，肺鳞癌细胞株； 在L9981细胞中转染nm23-H1可显著上调KAI1的mRNA表达水平 Cell lines Cell li