生物化学第6章蛋白质的结构和功能课件.pptVIP

第六章 蛋白质的结构和功能;主要内容;肌红蛋白与血红蛋白;Mb与Hb结构上的相同与不同之处是什么？;协同效应与别构效应;镰刀型贫血病;免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）;1、免疫球蛋白是指具有抗体（antibody）活性，或化学结构与抗体相似的球蛋白。一般情况下，免疫球蛋白指的就是抗体。 2、抗体具有两个显著特点：高度的特异性和庞大的多样性。 ;3、抗原(antigen, Ag)是一类能诱导免疫系统发生免疫应答，并能与免疫应答的产物(抗体或效应细胞)发生特异性结合的物质。抗原具有免疫原性和反应原性两种性质。 4、免疫原性是指抗原刺激机体后，机体免疫系统能形成抗体或致敏T淋巴细胞的特异性免疫反应。 5、反应原性是指产生的抗体或致敏T淋巴细胞能与抗原进行特异性结合的免疫反应。;6、既具免疫原性又具反应原性的抗原称免疫原。某种物质之所以能成为一个良好的免疫原，是因为它有特异的化学结构，这就是抗原决定簇。抗原决定簇可以与相应的淋巴细胞表面的受体蛋白结合引起免疫应答。一个抗原决定簇只能激活一种淋巴细胞(对于B细胞)只刺激产生一种类型抗体。一个抗原可以有一个或多个抗原决定簇。抗原决定簇少，抗体与抗原结合就少，往往就见不到反应。天然抗原或复杂的半抗原决定簇往往多达几十个，因此可以与很多抗体分子交互结合。;7、有些分子本身没有免疫原性，不能引起免疫反应，但是如果把它们和某些载体分子，如蛋白质分子结合起来就有了免疫原性，就能使动物对这一复合分子产生特异的抗体。这种本身无免疫原性，但有反应原性，一旦把它与载体结合就有了免疫原性的物质，就称半抗原或不完全抗原。 ;二、IgG的结构;—轻链：25KD，214个氨基酸残基 —重链：50KD，450-570个氨基酸残基;可变区 VL VH 恒定区 CH1, CH2, CH3 铰链区;可变区又可进一步分为超变区（或称互补决定区）和骨架区。;三、免疫球蛋白对抗原的识别;蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白;抗体的抗原结合部位与抗原决定簇分子表面基团的相互作用，包括静电引力、氢键、范德华力、疏水作用等。 抗原与抗体的结合需要合适的温度、pH、缓冲体系，这种结合是可逆的。 ;蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白;四、免疫球蛋白的类别;IgG是血清中最丰富的免疫球蛋白。;五、多克隆抗体与单克隆抗体;单克隆抗体是由生长在细胞培养物中的同一B细胞的群体（一个克隆）合成并分泌的、均一的、识别同一抗原表位的抗体。;六、基于免疫反应的生化分析方法;酶标仪和酶标板;基本原理;ELISA的基本类型;ELISA的基本类型;ELISA的基本类型;免疫印迹测定（Western blotting）是一种借助特异性抗体鉴定抗原的有效方法。将含有目标蛋白(抗原)的样品首先用电泳分离后，通过转移电泳转印至硝酸纤维素膜或其它膜的表面，然后将膜表面的蛋白质再用抗原抗体反应进行特异性检测。;Western blotting;免疫亲和层析（Immunoaffinity chromatography）是利用抗原和抗体所具有的专一亲和力而设计的层析技术。抗原和抗体在一定条件下能紧密结合成复合物，而这种结合又是可逆的，改变条件可将抗原抗体解离。当把抗原和抗体的一方(称配体)结合在惰性载体上使其固相化，另一方随流动相流经该载体，双方即结合为一整体。然后设法将它们解离，从而得到与配体有特异结合能力的某一特定的物质。;蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白;肌球蛋白与肌动蛋白;肌纤维的结构;肌原纤维由粗丝和细丝构成;粗肌丝是由许多肌球蛋白分子通过尾部缔合组成的分子束。M线两侧的肌球蛋白对称排列，杆部均朝向粗肌丝的中段，头部则朝向粗肌丝的两端的两端并露出表面。;细肌丝由三种蛋白质分子组成，即肌动蛋白、原肌球蛋白和肌原蛋白。后二种属于调节蛋白，在肌收缩中起调节作用。肌动蛋白（actin）分子单体为球形，许多单体相互接连成串珠状的纤维形，肌动蛋白就是由两条纤维形肌动蛋白缠绕形成的双股螺旋链。每个球形肌动蛋白单体上都有一个可以与肌球蛋白头部相结合的位点。;原肌球蛋白（tropomyosin）是由较短的双股螺旋多肽链组成，首尾相连，嵌于肌动蛋白双股螺旋链的浅沟内。肌原蛋白（troponin）由3个球形亚单位组成，分别简称为TnT、 TnI和 Tnc 。肌原蛋白借TnT而附于原肌球蛋白分子上， TnI是抑制肌动蛋白和肌球蛋白相互作用的亚单位， Tnc 则是能与Ca2＋相结合的亚单位。;骨骼肌的主要蛋白是肌球蛋白和肌动蛋白;肌动蛋白(actin)分子量为43kD，外观呈哑铃状，其确切分子结构尚不清楚。肌动蛋白存在于所有真核细胞中，肌动蛋白在真核细胞进化过程中相当保守，在哺乳动物和鸟类细胞中至少已分离到6种肌动蛋白，4种称为α-肌动蛋白，