《免疫球蛋白与抗体》课件.ppt

第二章  抗体和免疫球蛋白;1.抗体（antibody，Ab）;;②存在部位： 血清、其他体液或外分泌液中。 将抗体介导的免疫称为体液免疫。 将含有抗体的血清称为抗血清或免疫血清。 ③电泳区带：大部分在γ区带，故曾有γ球蛋白（或丙种球蛋白）之称。;2.免疫球蛋白;;免疫球蛋白的存在形式 BCR（B细胞受体) － 膜型mIg 抗体 － 分泌型;第一节：免疫球蛋白的结构;（一）重链与轻链 1.重链（heavy chain， H链） 450～550个氨基酸残基，分子量约50～75kD。 ;氨基酸端 N;根据Ig重链抗原性的差异，Ig可分为五类即：; （二）可变区和恒定区; 1.可变区（variable region，V区） 近N端的1/2 L链和1/4（或1/5）H链，氨基酸的组成及序列变化较大，而得名。 ⑴ 超变区（hypervariable region，HVR） V区内变化最为剧烈的特定部位。L链3个，H链3个。 因其在空间结构上可与抗原决定簇形成精密的互补，故又称互补性决定区（complementarity determing region，CDR）;或称CDR;不同Ig分子在超变区结构上各自具有独特的氨基酸排序和构型特点，也称为Ig分子的独特型或独特型决定簇。 ;⑵骨架区（framework region，FR） Ig分子V区超变区之外的部位，其氨基酸组成及排列相对保守。 作用：主要是稳定CDR的空间构型，以利IgCDR与抗原表位精细的特异性结合。; 二、免疫球蛋白的功能区（结构域）;;（2）功能区的功能 1. VL和VH是抗原结合的部位（FV区）。 2. CL和CH1上具有同种异型的遗传标记。 3. IgG的CH2和IgM的CH3补体结合单位，具有补体固有成分C1q的结合点，参与激活补体系统。 4. CH3/CH4具有结合包括单核细胞、巨噬细胞、粒细胞、B细胞、NK细胞等细胞的Fc段受体的功能。 5. IgG的CH2+CH3 具有介导IgG通过胎盘的特性。 6. IgE的CH2和CH3可与肥大细胞和嗜硷性粒细胞结合;绞链区（hinge region） 位于CH1～CH2之间。富含脯氨酸，对蛋白酶敏感，易伸展弯曲。作用： 1.弯曲利于V区与不同距离的抗原表位结合。2.使Ig分子发生“T” “Y”的构型改变，暴露补体结合位点。;;“T” “Y”;三、免疫球蛋白的其他结构 1.J链（jioning chain，J链） 由浆细胞合成的多肽链。 主要作用：在H链的羧基端将Ig单体连接成双体或多聚体，起稳定多聚体结构及参与体内运转的作用。;四、免疫球蛋白的水解片段;在绞链区近N端切断重链;1.有利于阐明Ig的结构及生物活性 2.有利于生物制品的生产和纯化，避免超敏反应的发生。;第二节?抗体的生物学作用;与细胞表面Fc受体结合 1.调理呑噬作用：促进吞噬细胞的吞噬作用。 2.发挥抗体依赖的细胞介导的的细胞毒作用（ADCC） ;第三节 各类免疫球蛋白的特性;二、IgM 1. IgM在细胞上为单体形式（膜型m IgM ）、在血清中为五聚体形式。又称巨球蛋白。因不能通过血管壁，故主要在血液中 2.个体发育中合成最早的Ig。胎儿发育晚期即可合成，母体的IgM不能通过胎盘，所以脐带血中检出IgM提示宫内感染。 3. IgM是免疫应答过程中最早出现的抗体，半衰期较短，有助于感染性疾病的早期诊断。 4.天然的血型抗体。 5.激活补体和免疫调理作用较IgG强,中和毒素和抗病毒的能力低于IgG。;;;四、IgE 1. 血清中含量最低。 2. 对肥大细胞及嗜碱性粒细胞有高度的亲和力。与Ⅰ型超敏反应的发生有关。 3.可能与机体抗寄生虫免疫有关。 五、IgD 1. 血清含量极低。 2. 对蛋白酶敏感，极易降解。;;;第四节 抗体的制备 一、多克隆抗体(PcAb—pAb) 由多个克隆细胞产生的多种抗体的混合物即多克隆抗体，也称第一代人工抗体; 二、单克隆抗体 (McAb或mAb) 由一个始祖细胞分化、增殖所产生的遗传性状完全相同的细胞群称为克隆。 由一个克隆B细胞产生的、只作用于单一抗原表位的高度特异性抗体称为单克隆抗体。又称第二代人工抗体。 优点：特异性强；效价高；具有高度的均一性。 单克隆抗体是用杂交瘤技术制备的。; 原理： 免疫小鼠的脾细胞（含大量B细胞）与同系小鼠骨髓瘤细胞融合，形成具有亲本细胞共同特点的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既有脾细胞产生特异性抗体的功能，又有瘤细胞可长期在体外传代培养的特点。 ;三、基因工程抗体 由基因重组技术制备的抗体称为基因工程抗体，也称第三代抗体。 原理：借助DNA重组和蛋白质工程技术，在基因水平上对编码